水稻紋枯病菌PG的分離純化、理化性質(zhì)及Rspg1基因的克隆與表達(dá).pdf_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè)，還剩67頁(yè)未讀， 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、水稻紋枯病菌(Rhizoctonia solani)產(chǎn)生的多聚半乳糖醛酸酶(PG)是一個(gè)重要的致病因子。本研究以丙酮法提取病菌PG粗蛋白，后依次經(jīng)DEAESepharose Fast Flow離子交換柱、Phenyl-Sepharose6 Fast Flow疏水柱、SephadexG-75凝膠柱和DE52離子交換柱層析，獲得具有較高活性的PG純化蛋白。該P(yáng)G蛋白分子量為39.81kD，等電點(diǎn)為4.58；含有糖基(含糖量為1.48％)而不

2、含脂類物質(zhì)，是一種糖蛋白；蛋白部分含有α-氨基，但不含芳香族氨基酸。經(jīng)測(cè)定，這種PG蛋白在pH4-12范圍內(nèi)均有活性，但pH5時(shí)活性最大；對(duì)熱(≥40℃)不穩(wěn)定，100℃下水浴20min活性完全喪失；對(duì)紫外線、氯仿、胰蛋白酶和蛋白酶K均敏感，處理后活性分別下降60.0％、48.3％、65.0％和68.3％。
　　 根據(jù)GenBank中立枯絲核菌PG基因序列(FJ544455、FJ544456、DQ848983)特征設(shè)計(jì)特異引物，

3、通過(guò)PCR技術(shù)獲得水稻紋枯病菌多聚半乳糖醛酸酶全長(zhǎng)基因Rspg1。該基因大小為1395bp，推測(cè)含有5個(gè)內(nèi)含子(57bp、57bp、59bp、66bp、61bp)，其序列與玉米紋枯病菌pg1基因(FJ544456)相似性達(dá)99％。
　　 以pET-28a(+)為載體、IPTG為誘導(dǎo)物，將Rspg1基因轉(zhuǎn)入Escherichia coliBL21(DE3)進(jìn)行表達(dá)。結(jié)果表明，在IPTG誘導(dǎo)下，含有Rspg1基因的轉(zhuǎn)化菌培養(yǎng)破碎上清

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽，若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間，僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請(qǐng)與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論