胭脂魚消化系統(tǒng)的發(fā)育及肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶I動力學(xué)特征的研究.pdf

1、胭脂魚(Myxocyprinus asiaticus)是亞口魚科在亞洲的唯一代表，被列為國家二級保護動物，在地理分類上都具有重要的研究價值。目前，國內(nèi)外關(guān)于胭脂魚的研究主要集中在其幼魚的營養(yǎng)需求和繁殖技術(shù)等方面，尚未關(guān)于胭脂魚消化系統(tǒng)發(fā)育和肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ的酶動力學(xué)的研究。因此，本文擬對胭脂魚消化系統(tǒng)的發(fā)育進(jìn)行研究，并分析胭脂魚發(fā)育階段消化酶的活性和肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ的酶動力學(xué)特征的變化，以期為胭脂魚的形態(tài)學(xué)、營養(yǎng)學(xué)和發(fā)育生物學(xué)提供基

2、礎(chǔ)資料。其研究結(jié)果如下:
　　 1.胭脂魚仔、稚魚消化系統(tǒng)的發(fā)生
　　 本實驗利用組織學(xué)和超微結(jié)構(gòu)的方法，觀察和研究了出膜后1-56日齡的胭脂魚仔、稚魚消化道及其附屬結(jié)構(gòu)（肝臟，胰臟和膽囊）的個體發(fā)生。以投喂模式為基礎(chǔ)，并且分析了消化系統(tǒng)主要的組織學(xué)特點，出膜后胭脂魚仔、稚魚的發(fā)育主要分為三個階段:階段1（內(nèi)源性營養(yǎng)期）:1-6日齡;階段2（混合性營養(yǎng)期）:7-14日齡;階段3（專一性外源性營養(yǎng)期）:15日齡以后。剛出膜

3、時，仔魚消化道是一條未分化的直管。4日齡時，仔魚口打開，此時消化道分化為口咽腔，食道和腸道。7日齡仔魚開始攝食。15日齡時卵黃囊吸收完全。56日齡稚魚顯示整齊排列的長微絨毛，豐富的空泡和蛋白質(zhì)包涵體。從6日齡起，胭脂魚仔魚胰臟，肝臟和膽囊開始執(zhí)行其功能，這使得仔魚能夠攝取、消化和吸收外源性食物。我們的研究表明，與其他有功能性胃的硬骨魚相比，無胃胭脂魚消化道發(fā)育完全相對較慢。
　　 2.胭脂魚仔、稚魚消化酶活性的變化
　　

4、 本實驗研究了胭脂魚仔、稚魚胰腺酶（胰蛋白酶和淀粉酶）和腸酶（堿性磷酸酶和氨肽酶N）從出膜到40日齡期間的發(fā)生。本實驗所測定的幾種酶在剛孵化出來的仔魚當(dāng)中都能檢測到。淀粉酶活性在3至14日齡上升，這表明早期發(fā)育過程中淀粉酶不斷生成且在這個過程中碳水化合物能被很好地分解。淀粉酶比活性在14至17日齡期間下降，在20日齡時又開始上升，這可能與其攝入的餌料種類相關(guān)。胰蛋白酶比活性在14至25日齡期間發(fā)生了顯著性的變化。堿性磷酸酶活性在9至14

5、日齡期間上升，表明腸細(xì)胞刷狀緣的形成。堿性磷酸酶活性在14日齡和20日齡兩個時期達(dá)到較高值，而在20-40日齡之間保持不變?；谝陨嫌^察所得，胭脂魚消化系統(tǒng)似乎直到20日齡才完全發(fā)育成熟。此后胭脂魚具有成魚的消化模式，所以胭脂魚從20日齡開始進(jìn)行食性轉(zhuǎn)變是可行的。
　　 3.胭脂魚發(fā)育過程中肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ動力學(xué)特征的變化
　　 從出膜到1齡，胭脂魚肝臟中總?cè)鈮A濃度隨著年齡的上升而逐漸上升。胭脂魚肝臟中總?cè)鈮A濃度的增加

6、表明肝臟組織合成肉堿的能力增強或吸收肉堿的能力提高。胭脂魚從68日齡至1齡期間，肌肉組織中的游離肉堿濃度和總?cè)鈮A濃度都逐漸增加。肌肉組織中的游離肉堿濃度和總?cè)鈮A濃度的增加是為了促進(jìn)脂肪酸的β-氧化，從而產(chǎn)生大量能量，滿足胭脂魚發(fā)育期間肌肉的快速增長對能量的需求。腸道中乙酰肉堿濃度和總?cè)鈮A濃度在發(fā)育期間波動較大，這是因為在胭脂魚發(fā)育期間，腸道不斷發(fā)育成熟，經(jīng)歷了一系列的變化。胭脂魚肝臟組織中的AC/FC之比剛出膜時為1.03，4月齡時上升

7、至1.61，但1齡時顯著下降，但2齡時達(dá)到1.73，顯著高于1齡時。胭脂魚肌肉組織中的AC/FC之比最高時是在68日齡時，最低時是在4月齡時。剛出膜的胭脂魚仔魚的CPTⅠ的表觀Km值（以肉堿做底物）為4.51±0.16 mM，肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ的動力學(xué)參數(shù)Vmax為4.53±0.09nmol/min/mg protein。腸道組織中的肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ的動力學(xué)參數(shù)Vmax隨著年齡增長呈上升趨勢。胭脂魚不同時期不同組織（肝臟、肌肉和腸道）