辣椒NAC cDNA的分離及其載體構(gòu)建與遺傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、辣椒(Capsicum annuum)是病害發(fā)生較容易成災(zāi)的茄科作物，其功能基因組學(xué)研究是發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用重要抗逆基因開展辣椒遺傳改良的重要基礎(chǔ)。本研究從辣椒cDNA文庫中分離獲得可能參與辣椒適應(yīng)逆境的候選基因的全長(zhǎng)cDNA，分別構(gòu)建其表達(dá)載體，并將其轉(zhuǎn)入到煙草中，獲得轉(zhuǎn)基因植株。主要試驗(yàn)結(jié)果如下： 1) NAC候選基因的cDNA的分離及其結(jié)構(gòu)分析：本研究采用基于PCR技術(shù)的96孔板cDNA文庫篩選的方法，獲得了兩個(gè)NAC基因全長(zhǎng)cD

2、NA，命名為CaNAC1和CaNAC2。經(jīng)生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，這兩個(gè)基因都含有一個(gè)保守的NAC功能域，屬于α-NAC分子伴侶家族的成員。 2)載體構(gòu)建及煙草遺傳轉(zhuǎn)化：通過Gateway載體構(gòu)建技術(shù)構(gòu)建了該基因的植物干擾表達(dá)載體和植物超表達(dá)載體，用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)化煙草，CaNAC1獲得50個(gè)T0代煙草超表達(dá)株系，CaNAC2獲得了30個(gè)T0代煙草超表達(dá)株系。 以上的研究為進(jìn)一步分析CaNAC1和CaNAC2的功能奠定基