溫瑞塘河水體沙門氏菌與常用水質(zhì)指示微生物及理化指標(biāo)的關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、細(xì)菌、病毒和寄生蟲病原體在不同環(huán)境條件下的生態(tài)和生存特點(diǎn)各異，表明單一的指示微生物并不能在所有類型的水域中預(yù)測(cè)到不同宿主的糞便污染情況，進(jìn)而推測(cè)水體中腸道病原體的存在。如果指示生物和病原體之間的相關(guān)性確實(shí)存在，則有必要找出在哪些情況下，在多大程度上這些指示微生物可以作為糞便污染的可靠指標(biāo)。
　　大腸桿菌群類細(xì)菌是目前國際上通用的檢測(cè)水體受糞便污染的指示微生物，其數(shù)量能直接表明水體受糞便污染的程度，適用于河流、湖泊等一般水質(zhì)檢測(cè)。沙

2、門氏菌(Salmonella，SM)作為一種人畜共患病原體，在受污染的水體中普遍存在，對(duì)人和動(dòng)物的健康帶來了極大的危害，因此從人類健康角度分析，污染水體中沙門氏菌具有重大的研究價(jià)值。
　　本論文以浙江省溫州市溫瑞塘河為研究對(duì)象。根據(jù)塘河的河網(wǎng)特點(diǎn)、地形地貌特征，在塘河各類型河道中的40多個(gè)常規(guī)監(jiān)測(cè)站位中設(shè)置5個(gè)典型站位，如特定場所醫(yī)院、養(yǎng)殖場等周邊河道。運(yùn)用傳統(tǒng)微生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)和新型分子生物學(xué)手段，分析總大腸桿菌、糞大腸桿菌、大腸

3、埃希菌和病原菌沙門氏菌在不同水體中的存在情況和分布規(guī)律，并且同時(shí)進(jìn)行常規(guī)水質(zhì)因子、指示微生物與病原菌的相關(guān)性的研究。
　　為建立一種快捷、高效的檢測(cè)病原微生物的方法，本研究針對(duì)各種病原微生物的特異基因采用環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(loop-mediated isothermal amplification，LAMP)進(jìn)行檢測(cè)，初步調(diào)查并篩選，考察了沙門氏菌的分布特征及其與指示微生物之間的關(guān)系。LAMP方法的特異性強(qiáng)，靈敏度高，快速簡便，

4、為水體病原微生物的檢測(cè)構(gòu)建了很好的技術(shù)平臺(tái)。
　　本研究的結(jié)果如下:
　　1.數(shù)量分布特點(diǎn):本研究選擇總大腸桿菌、糞大腸桿菌、大腸埃希菌作為水體中糞便指示微生物，利用多管發(fā)酵法進(jìn)行檢測(cè)，然后對(duì)傷寒沙門氏菌(Salmonella typhi)的特異phoP基因建立環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增快速檢測(cè)(LAMP)方法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:大腸埃希氏菌在各個(gè)檢測(cè)點(diǎn)均有檢出，濃度隨季節(jié)波動(dòng)于101-103CFU/mL，總大腸桿菌、糞大腸桿菌的檢出濃度大

5、致為103-107CFU/L，沙門氏菌陽性檢出率在污染較為嚴(yán)重的B7和C1兩點(diǎn)為60％，而A3和W3相應(yīng)較低，為20％。
　　2.時(shí)空差異:沙門氏菌在各個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)陽性檢出率之間存在一定的差異，夏季的陽性檢出率明顯比冬季高。各指示菌在冬夏兩季濃度均在104CFU/L以上，另外，處于人口分布密集的生活區(qū)內(nèi)的C1，其糞大腸桿菌及大腸埃希氏菌濃度較其他檢測(cè)點(diǎn)高出大約3～4個(gè)數(shù)量級(jí)。各個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)中指示微生物濃度隨季節(jié)變化的情況差異顯著，除C1以