抗鴨胸腺細(xì)胞單克隆抗體的制備及其免疫組織化學(xué)研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)以成年鴨胸腺細(xì)胞為免疫抗原，免疫BALB/c小鼠，分離脾細(xì)胞，并與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞融合，獲得了5株分泌單克隆抗體(mAb)的雜交瘤細(xì)胞(B6、B8、C12、E6、H5)。經(jīng)鑒定可在體外長期培養(yǎng)，并能持續(xù)、穩(wěn)定的分泌抗體?！　⊥ㄟ^免疫組織化學(xué)方法，以5株雜交瘤細(xì)胞分泌的單克隆抗體為第一抗體，以HRP標(biāo)記的羊抗鼠Ig抗體作為第二抗體，DAB-H2O2做底物，示蹤單克隆抗體陽性細(xì)胞在鴨免疫器官(胸腺、法氏囊和脾臟)不同發(fā)育時期的發(fā)

2、生與分布，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明B8、C12、E6、H5四株雜交瘤細(xì)胞分泌的抗體在組織中反應(yīng)的陽性細(xì)胞是一致的。在8周齡鴨胸腺的髓質(zhì)中大部分的淋巴細(xì)胞染色，皮質(zhì)中致密排列的小淋巴細(xì)胞不染色。1日齡、1周齡、16周齡鴨胸腺中情況基本一致。在24周齡鴨胸腺的髓質(zhì)中只有少部分淋巴細(xì)胞染色。法氏囊濾泡的皮質(zhì)和髓質(zhì)以及粘膜上皮與淋巴小結(jié)相連的部位均有陽性細(xì)胞分布，細(xì)胞形態(tài)不同，有少量淋巴細(xì)胞(主要分布于皮質(zhì)和膜上皮與淋巴小結(jié)相連的部位)和胞漿中具有分泌性物

3、質(zhì)，形態(tài)不規(guī)則的淋巴樣細(xì)胞(主要分布于髓質(zhì)中)呈陽性，分布情況在不同日齡鴨的法氏囊中變化不大。在鴨脾臟的生發(fā)中心只有極個別的淋巴細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞染色，大部分的淋巴細(xì)胞不染色，生發(fā)中心外周淋巴細(xì)胞染色明顯。紅髓中的漿細(xì)胞和紅細(xì)胞不染色。動脈周淋巴組織和橢圓體周淋巴組織中的淋巴細(xì)胞多數(shù)染色。B6株雜交瘤細(xì)胞分泌的抗體在鴨胸腺中染色結(jié)果與C12株分泌的抗體的染色結(jié)果相似，為髓質(zhì)中部分成熟的淋巴細(xì)胞染色。在法氏囊濾泡中多數(shù)的淋巴細(xì)胞和上皮細(xì)胞染