淡黑巨藻醇提物抗糖尿病作用及其機(jī)制研究.pdf

1、糖尿病包括因胰島素分泌不足和（或）胰島素功能損傷引發(fā)的高血糖所致的一系列疾病。隨著人們生活品質(zhì)的提高和生活方式的轉(zhuǎn)變，Ⅱ型糖尿?。═2DM）的發(fā)病率日趨增高，嚴(yán)重危害著人們的健康。胰島素抵抗是大多數(shù)T2DM的始因。降糖藥大多具有不同程度的毒副作用且作用的方式較為單一，常有一定的不良癥狀及反應(yīng)。因此，研究和開發(fā)天然新型保健食品和藥物成為臨床的迫切需要。已有研究表明以海藻為代表的海洋生物具有各種生物活性，其中包括降血糖生物活性。本課題以淡黑

2、巨藻（Lessonia nigrescens）為研究對(duì)象，探討了淡黑巨藻55％醇提物抗糖尿病作用及其機(jī)制研究。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴前期對(duì)13種海藻的活性物質(zhì)進(jìn)行分步提取得到43種提取物，并通過α-葡萄糖苷酶活性抑制以及HepG2胰島素抵抗模型方法對(duì)提取物進(jìn)行體外降血糖活性篩選。結(jié)果顯示：淡黑巨藻55%醇提物（CZ02-1）的體外降血糖效果最佳（10 mg/mL，酶抑制率94.33%；200μg/mL，細(xì)胞增殖率54.02%

3、）。⑵基于高糖高脂飼料加STZ誘導(dǎo)T2DM小鼠模型，以空腹血糖值（FBG）和糖耐量（OGTT）為指標(biāo)探究CZ02-1低、中、高劑量對(duì)T2DM小鼠的降糖作用以及對(duì)體重變化的影響，并觀察小鼠肝臟和腎臟HE染色的病理情況。結(jié)果顯示：與模型組相比，給藥28d時(shí)CZ02-1不同劑量組小鼠FBG均降低且差異極顯著（P＜0.01），與給藥0d相比，各組降糖百分率分別為54.90%、51.93%和52.04%；與模型組相比，CZ02-1各劑量組的AUC

4、均下降，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可判定OGTT指標(biāo)為陽性；CZ02-1各劑量組對(duì)T2DM小鼠體重下降癥狀的緩解作用不明顯（p＞0.05）；HE染色結(jié)果顯示，CZ02-1各劑量組對(duì)T2DM小鼠的肝臟和腎臟細(xì)胞在程度以及數(shù)量上有良好的修復(fù)功能。⑶利用RT-PCR法檢測(cè)IRS1、PI3K和JNK1 mRNA在肝臟組織中的表達(dá)情況。結(jié)果顯示：模型組小鼠肝臟的IRS1、PI3K mRNA的相對(duì)表達(dá)量均低于正常組且前IRS1 mRNA差異性顯著（P＜0.0

5、5）， JNK1高于正常組（P＜0.05）。通過各劑量給藥組的數(shù)據(jù)得知，CN02-1可通過上調(diào)IRS1和PI3K mRNA的表達(dá)，抑制JNK1 mRNA的表達(dá)。⑷基于16SrRNA基因V3-V4區(qū)的腸道菌群高通量測(cè)序技術(shù)，研究CZ02-1對(duì)Ⅱ型糖尿病小鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果表明：在物種門水平上，模型組擬桿菌門（Bacteroidetes）明顯低于正常組，而厚壁桿菌門（Firmicutes）明顯高于正常組，各劑量組對(duì)于擬桿菌門有所上調(diào)