2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、眾所周知，家蠶桿狀病毒(BmNPV)多角體啟動(dòng)子具有超高效的啟動(dòng)功能，在昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中常被用來(lái)啟動(dòng)外源基因的表達(dá)。通過(guò)酵母單雜交技術(shù)篩選出多種與多角體啟動(dòng)子存在相互作用的蛋白因子，其中ORF60蛋白被認(rèn)為是BmNPV的DNA結(jié)合蛋白，且可能具有調(diào)控病毒基因轉(zhuǎn)錄的功能，但其調(diào)控機(jī)制還不是很清楚。
　　本研究構(gòu)建了orf60缺失型病毒orf60-ko-Bacmid。Bac-to-Bac技術(shù)將敲除的片段再次補(bǔ)回到家蠶桿狀病毒(B

2、mNPV)基因組中，通過(guò)此技術(shù)，我們又成功的構(gòu)建了orf60補(bǔ)回型病毒orf60-re-Bacmid。然后將三種病毒（wtBacmid、orf60-ko-Bacmid和orf60-re-Bacmid）分別轉(zhuǎn)染家蠶BmN細(xì)胞，病毒滴度和熒光定量PCR(qPCR)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，orf60是BmNPV基因組復(fù)制的必需基因，也是包裝成成熟病毒的必需基因。反轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)定量PCR(RT-qPCR)分析orf60基因的轉(zhuǎn)錄時(shí)相，結(jié)果表明orf60基因是

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