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文檔簡介
1、為了研究半胱胺對山羊瘺管手術(shù)后T淋巴細胞增殖的影響及其機理研究,本文進行了如下試驗:
試驗一:口服半胱胺鹽酸鹽對瘺管手術(shù)后山羊外周血T淋巴細胞增殖及血清中幾項指標(biāo)的影響
8只本地山羊分為試驗組和對照組,分圈飼養(yǎng),每只羊分別先后施行瘤胃、十二指腸瘺管手術(shù)。術(shù)前每只山羊每天飼喂精料300g,自由采食花生桿和飲水,瘤胃瘺管安裝手術(shù)前第3天試驗組在精料中添加半胱胺鹽酸鹽微膠囊45mg/kg·BW·d(CT2000,含
2、半胱胺30%),并持續(xù)添加直至試驗結(jié)束;瘤胃術(shù)手后恢復(fù)14天,安裝十二指腸瘺管,恢復(fù)期與手術(shù)后飼喂方案同瘤胃手術(shù)。分別于瘤胃手術(shù)前第3天、術(shù)后1、2、3、4、8天,十二指腸手術(shù)前、術(shù)后1、3、8天頸靜脈無菌采血,檢測外周血T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率。另外采集部分血液,分離血清,檢測血清中IL-2和GSH含量。結(jié)果顯示,對照組瘤胃手術(shù)后1天T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率下降了60.52%(P<0.05),此后逐漸恢復(fù),但術(shù)后8天仍低于術(shù)前水平;十二指腸手術(shù)后1天
3、T細胞轉(zhuǎn)化率也顯著下降(31.73%,P<0.05),于第8天恢復(fù),表明手術(shù)應(yīng)激抑制了外周血T淋巴細胞的增殖功能。在口服半胱胺鹽酸鹽山羊觀察到手術(shù)對外周血T淋巴細胞增殖的影響較小,與未施加手術(shù)相比,兩次手術(shù)后的T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率均無顯著改變,且有逐漸上升的趨勢。組間相比,試驗組T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率在瘤胃手術(shù)后1、2、3、4、8天分別比對照組高151.66%、52.07%、30.17%、96.96%和120.04%(P<0.05)。十二指腸手術(shù)
4、前和術(shù)后1、8天也顯著高于對照組148.28%、58.92%、55.36%(P<0.05)。表明半胱胺提高手術(shù)后T淋巴細胞的增殖能力,緩解手術(shù)造成的細胞免疫抑制。
瘤胃手術(shù)后第1天,對照組血清中IL-2含量有下降的趨勢(31.54%,P=0.121),在十二指腸手術(shù)后也有所下降。而試驗組在兩次手術(shù)后IL-2含量均無明顯變化(P=0.984,P=0.776)。組間相比,血清中的IL-2含量在瘤胃手術(shù)后第1天和十二指腸手術(shù)后第
5、1天,試驗組顯著高于對照組(P<0.05),在十二指腸手術(shù)后第3天,也趨向于高于對照組(P=0.142)。提示手術(shù)創(chuàng)傷可引起血清中IL-2含量的下降,口服半胱胺鹽酸鹽可以阻止手術(shù)創(chuàng)傷引起的血清中IL-2含量的下降。
瘤胃手術(shù)后第1天,對照組血清中的GSH含量顯著下降(35.90%,P<0.05),在十二指腸手術(shù)后也有所下降。試驗組在瘤胃手術(shù)后第1天無明顯變化(P=0.439),在十二指腸手術(shù)后顯著下降(45.35%,P<0
6、.05),與其在術(shù)前水平較高有一定的關(guān)系,但恢復(fù)較快,在術(shù)后三天已高于術(shù)前水平。組間相比,十二指腸手術(shù)后第3天,試驗組顯著高于對照組14.67%(P<0.05);在瘤胃手術(shù)后第1天、十二指腸手術(shù)后第8天有高于對照組的趨勢(0.05
試驗二:半胱胺影響外周血T淋巴細胞增殖的體外研究
無菌采集
7、山羊新鮮肝素抗凝血,分離得到淋巴細胞。細胞分為對照組(培養(yǎng)液)和半胱胺組(半胱胺40μg/ml)培養(yǎng)后檢測其轉(zhuǎn)化率和淋巴細胞內(nèi)GSH含量。此外,分離的淋巴細胞分為對照組(培養(yǎng)液)和IGF-I組(IGF-I25ng/ml),培養(yǎng)后檢測其轉(zhuǎn)化率。結(jié)果顯示,半胱胺組T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率高于對照組105.24%(P<0.05),同時,半胱胺顯著地增加了T淋巴細胞內(nèi)的GSH含量(225.94%,P<0.05);IGF-I組T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率增加39.2
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