內(nèi)生細(xì)菌EBS05誘導(dǎo)煙草抗TMV機(jī)理的研究.pdf

1、EBS05是從樟樹（Cinamonum camphora）植物組織中分離的一株內(nèi)生枯草芽孢桿菌。該菌株具有較強(qiáng)的植物根際定殖能力，且對多種植物病原真菌和煙草花葉病毒具有穩(wěn)定的抑制活性，其代謝活性物質(zhì)具備耐酸堿、耐鹽、耐高溫、抗生作用穩(wěn)定等作為生防因子的優(yōu)良特性。目前，已明確EBS05的代謝活性物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)為Leu7-surfactin A，并證明該活性物質(zhì)是EBS05發(fā)揮生防作用的關(guān)鍵因子，是誘導(dǎo)植物系統(tǒng)抗病性的有效激發(fā)子。為了進(jìn)一步

2、挖掘內(nèi)生細(xì)菌EBS05的生防潛力，本文對EBS05的促生作用、LeuT-surfactin A誘導(dǎo)煙草抗煙草花葉病毒的信號傳導(dǎo)途徑及煙草防衛(wèi)反應(yīng)相關(guān)酶PAL、POD及SOD活性變化進(jìn)行了研究，以期揭示內(nèi)生細(xì)菌EBS05對煙草花葉病的生防機(jī)制，為新型生防菌劑的研發(fā)提供理論依據(jù)。研究結(jié)果如下:
　　1、內(nèi)生細(xì)菌EBS05及其代謝活性物質(zhì)對煙苗生長具有明顯的促進(jìn)作用，其中，代謝活性物質(zhì)Surfactin A對煙草的促生作用不存在劑量效應(yīng)

3、。
　　2、通過空間隔離接種試驗(yàn)比較了原始菌株EBS05和突變菌株EBS05T對煙草普通花葉病的防治效果。結(jié)果表明，原始菌株EBS05對煙草普通花葉病毒病的防治效果為67.38％，突變株EBS05T的防治效果僅為19.08％。表明內(nèi)生細(xì)菌EBS05可誘導(dǎo)煙草對TMV的抗性，且Surfactin A是其誘導(dǎo)抗性的有效激發(fā)子。
　　3、采用RT-PCR和Real-time PCR技術(shù)檢測了誘導(dǎo)抗性信號傳導(dǎo)相關(guān)基因的表達(dá)差異。結(jié)果

4、表明，Surfactin A可誘導(dǎo)SA信號傳導(dǎo)途徑下游的關(guān)鍵調(diào)節(jié)基因NPR1提前和超量表達(dá)，進(jìn)而導(dǎo)致防衛(wèi)相關(guān)基因PR1a和PR1b的表達(dá)，使煙草植物獲得對TMV的系統(tǒng)抗性。同時(shí)，Surfactin A還可誘導(dǎo)JA/ET信號傳導(dǎo)途徑調(diào)節(jié)基因PDF1.2的瞬時(shí)超量表達(dá)。表明Surfactin A誘導(dǎo)煙草對TMV的系統(tǒng)抗性是通過SA信號傳導(dǎo)途徑實(shí)現(xiàn)的，并存在SA信號傳導(dǎo)途徑與JA/ET信號傳導(dǎo)途徑間的協(xié)同表達(dá)。
　　4、測定了防衛(wèi)反應(yīng)相