MicroRNA在鼻咽癌中的表達(dá)研究.pdf

1、復(fù) 旦 大 學(xué) 碩 上學(xué)位 論文指 導(dǎo) 小 組 成 員 名 單李 瑤 教 授復(fù) 月 _ 大學(xué)碩 士學(xué) 位論 文摘 要m ic roR N A 是最 近研 究發(fā)現(xiàn) 的一類長(zhǎng)度 約為 19一 25 個(gè) 核普 酸 的非編 碼 單鏈 小R N A 分子 ，其通 過(guò) 與靶 基 因 的 3’ 端 非翻 譯 區(qū)互 補(bǔ) 配對(duì) 結(jié)合 的方 法 ，從 而 調(diào) 控 內(nèi)源 基 因的表達(dá) 。m 1 R N A 作 為生物 體 生長(zhǎng) 發(fā)育 的重 要 調(diào) 控 基 因

2、 ，其 主要 研 究 方 向是 探 明 m i R N A S 與疾 病 的關(guān) 系 ，尤其 是 m i R N A 與腫 瘤 的關(guān)系 。雖然 近 年 來(lái) 對(duì) m i R N A 的研 究越 來(lái)越 廣泛 ，但 多集 中于肺 癌 、前 列 腺 癌 、乳腺 癌 、結(jié) 腸 直 腸 癌 等 較 為常 見(jiàn)和 廣 泛 的癌 癥 。因 為 鼻 咽癌 的地 區(qū) 分布極 不 平 衡 ，具有 明顯 的種族聚集性和地域性 ，因此 目前國(guó)外對(duì) 其 的研 究還 不

3、 是很深 入 。 鼻 咽癌 是 一種 上 皮 源 性 惡 性 腫 瘤 ，絕大 多數(shù)屬 于低 分 化 鱗狀 細(xì) 胞癌 ，惡 性 程 度 高 ，早期 易發(fā) 生淋 巴結(jié)和 全 身遠(yuǎn) 處 轉(zhuǎn) 移 ，具有相 當(dāng)高 的死 亡 率 。據(jù)世 界 衛(wèi) 生組 織 估 計(jì) ，鼻 咽癌 80% 發(fā) 生于 中 國(guó) ， 尤 其 高發(fā) 于 中國(guó)廣 西 及 廣 東地 區(qū) 。因此 我們 意 在 探 索 性的研 究 m iR N A 在 鼻 咽癌 發(fā) 生發(fā)展 中的調(diào) 控

4、作 用 。我們 利 用 m um i nam ic roR N A 表 達(dá) 譜 芯 片 ，對(duì) 8 例 鼻 咽癌 組 織 樣 本和 4 例 正常 組 織 樣 本 進(jìn) 行 了 m i R N A 表 達(dá) 譜 分 析 。運(yùn) 用 n l um i naB eadstudio 軟件 讀 取 芯 片數(shù) 據(jù) ， 完成 芯 片數(shù) 據(jù) 歸一 化 及 篩 選 修 補(bǔ) 處 理 后 ， 利 用 SA M 軟件 及 Cluster 軟 件 進(jìn)行 差 異 基 因

5、分 析 及 聚 類 分 析 。我們 篩 選 出 了 41 條在 鼻咽癌 組 織和 正 常 組織 中差 異 表 達(dá) 的 m i R N A ， 其 中包括 6 條 上 調(diào) 基 因 (m i R 一 135b ， m i R 一 18a， m i R 一 IO6b 等 )和 35 條 下 調(diào) 基 因 (m i R 一 34b ，m i R 一 34c，m i R 一 IOb ，l et一 7 ，m i R 一 449 ，m i R 一 49

6、7 等 )。為 了驗(yàn) 證 芯 片 結(jié) 果 的可 靠 性 ，我 們 應(yīng) 用 定 量 Rl’ -p C R 的 方 法 檢 測(cè) 了差 異 表 達(dá) 基 因 而 R 一 34 c、! et一 7g 以及 非 差 異表 達(dá) 基 因 m i R 一 30 c 的表 達(dá) 情 況 ，R l’ -PC R 結(jié) 果 與 芯 片 結(jié) 果 吻 合 。 同 時(shí) ，我 們 還 發(fā)現(xiàn) 這 些差 異 表達(dá) m 1 R N A 的聚 類 結(jié)果 能夠較 好 的與 病 人

7、的 臨床 分 期 聯(lián)系起 來(lái) 。我們 通 過(guò) Ta rgetscan 數(shù)據(jù) 庫(kù) ，對(duì) 差 異表 達(dá) mi R N A 的靶 基 因進(jìn) 行預(yù) 測(cè) ，并 將預(yù) 測(cè) 結(jié) 果 輸 入 G enM A P P 軟 件 進(jìn) 行 生物 學(xué)通 路 分 析 。在 通 路 分 析 中 ，大 部 分 靶 基因 富集度 高 的通 路 都涉 及 到信 號(hào)轉(zhuǎn) 導(dǎo)及 與癌 癥 發(fā) 生 相 關(guān) 的通 路 ， 例 如 E G F R 一 1 信號(hào) 通 路 ，M A PK

8、 信 號(hào)通 路 等 等 。其 中 ，小 G T P 酶介 導(dǎo) 的信 號(hào) 轉(zhuǎn) 導(dǎo) 通 路 最 為 顯 著 。同 時(shí) ， W nt 信 號(hào)通 路 的顯著 性 ， 則 與我們 實(shí) 驗(yàn) 室 過(guò) 去在 鼻咽癌 cD N A 表 達(dá) 譜 的研究 結(jié) 果 相 吻 合 。繼續(xù) 深 入研 究這 些 差異 m i R N A 在 生物 學(xué)通 路 中的調(diào) 控 作用 ，以及 尋 找 與 鼻咽 癌 發(fā)生 發(fā) 展 進(jìn) 程 相 關(guān) 的 臨床 診斷標(biāo) 記物 ， 則是