金絲桃素新制劑在體外抗AIV的研究.pdf

1、本研究首先采用Klein-Defors懸浮殺滅方法，進行金絲桃素新制劑對低致病力H9N2亞型AIV的殺滅效果實驗。選取1520枚10日齡SPF雞胚，分為金絲桃素新制劑給藥組(760枚雞胚)、利巴韋林對照組(608枚雞胚)和陽性對照組(152枚雞胚)。根據(jù)藥物濃度的不同，又將金絲桃素新制劑組分為5個小組，利巴韋林對照組分為4個小組。為了觀察不同作用時間金絲桃素新制劑對病毒的殺滅效果，再將上述各小組分為兩組，一組是將藥物與病毒的混合液作用1

2、0min后尿囊腔接種雞胚，另一組是將混合液作用30min后尿囊腔接種雞胚。采集尿囊液進行血凝試驗，并計算藥物對這兩種病毒的殺滅率。結(jié)果表明，0.0005mg/ml～0.34mg/ml濃度范圍內(nèi)的金絲桃素新制劑與H9N2亞型低致病力AIV作用30min，對其殺滅率分別為0，0，93.23﹪，99.99﹪，99.99﹪；作用10min，對其殺滅率分別為0，0，93.23﹪，99.99﹪，99.99﹪。此結(jié)果顯示，金絲桃素新制劑濃度達到0.0

3、136mg/ml時對低致病力H9N2亞型AIV具有很好的殺滅作用，且作用時間對殺滅效果幾乎沒有影響。 為了確定金絲桃素新制劑對高致病力AIV是否亦具有很好的殺滅作用，又選用1440枚10日齡SPF雞胚，采用與上述相同的實驗方法、雞胚分組方法及處理情況，進行金絲桃素新制劑對H5N1亞型AIV的殺滅效果實驗。結(jié)果表明，0.0005mg/ml～0.34mg/ml濃度范圍的金絲桃素新制劑與H5N1亞型AIV作用10min，對AIV的殺滅

4、率分別為0，0，94.37﹪，99.99﹪，99.99﹪；作用30min，對H5N1亞型AIV的殺滅率分別為0，32.39﹪，95.42﹪，99.99﹪，100﹪。此結(jié)果顯示，金絲桃素新制劑對高致病力H5N1亞型AIV的殺滅作用與濃度和作用時間均有密切的關(guān)系，即濃度越大、作用時間越長，其殺滅作用越強。 為了進一步明確金絲桃素新制劑通過不同給藥方式對AIV的殺滅效果，本研究選用H5N1亞型高致病力AIV，進行體外抗病毒試驗。選取1

5、62枚10日齡SPF雞胚，根據(jù)作用方式的不同，平均分為3組(即感染病毒同時給藥組、給藥后接種病毒組、先感染病毒后給藥組，每組54枚雞胚)，再將每組都設金絲桃素新制劑組(依據(jù)其濃度不同，將雞胚平均分為5組，每組9枚雞胚)和陽性對照組(9枚雞胚)。通過測定雞胚尿囊液的血凝效價和計算藥物對感染雞胚的保護率，判定金絲桃素新制劑抗H5N1亞型AIV的活性。實驗結(jié)果表明：(1)第一種方式即藥物在體外與病毒作用一段時間后再將其混合懸液接種雞胚，藥物濃

6、度在0.5mg/ml以上時，對感染雞胚的保護率達100﹪，同時藥物組的血凝效價明顯降低，與對照組相比差異極顯著(P＜0.01)；(2)第二種方式即在感染病毒前給藥，藥物濃度在2mg/ml以上時，對感染雞胚的保護率達100﹪，藥物組的血凝效價明顯降低，與對照組相比差異極顯著(P＜0.01)；(3)第三種方式即先感染病毒后給藥，藥物濃度在2mg/ml以上時，對感染雞胚的保護率達88.9﹪，血凝效價明顯降低，與對照組相比差異顯著(0.01＜P