金絲桃素新制劑抗口蹄疫病毒的試驗研究及金絲桃素的化學合成.pdf

1、本文以A類動物烈性傳染病之首的口蹄疫病毒(foot-and-mouthdiseasevirus，F(xiàn)MDV)為模型，進行金絲桃素新制劑抗RNA病毒的生物試驗研究。通過體外試驗、動物試驗及對小鼠脾淋巴細胞增殖試驗，探索性的研究金絲桃素新制劑在重大疫病防治方面的作用。另外，進行了金絲桃素化學合成的部分研究。具體研究如下： (一)金絲桃素新制劑抗口蹄疫病毒的生物試驗研究。 1.體外抗口蹄疫病毒試驗。本試驗分別通過對金絲桃素新制劑

2、在BHK-21細胞和3～4日齡乳鼠中，同利巴韋林和莪術油進行抗口蹄疫病毒的療效比較，確定金絲桃素新制劑的抗病毒效果。結果表明：金絲桃素新制劑具有很好的抗病毒效果。在BHK-21細胞中，金絲桃素新制劑可以使TCID50從6.22下降到3.22；在乳鼠中，金絲桃素新制劑在25mg.mL-1的濃度下，可分別使OZ和AsiaI型的FMDV分別下降3～4個滴度，同對照藥物相比表現(xiàn)出良好的抗病毒作用，差異顯著(P＜0.05)。 2.體內抗口

3、蹄疫病毒試驗。本試驗將四頭經過檢測無感染、無免疫的健康牛隨機分成兩組，用藥組3頭，對照組1頭。分別舌面攻毒10000ID50。攻毒同時，按照15g.Kg-1給小牛灌服金絲桃素粗品，每天一次持續(xù)七天。臨床癥狀結果顯示：用藥組只有一頭輕微發(fā)病，對照組發(fā)病嚴重。液相阻斷ELISA檢測抗體滴度顯示：用藥組抗體滴度產生晚于對照組，且抗體水平相對較低。說明金絲桃素可能對病毒吸附宿主細胞、病毒自身復制或機體免疫等一種或幾種途徑有影響。 3.淋

4、巴細胞增殖試驗。本試驗研究了金絲桃素新制劑對小鼠脾臟淋巴細胞增殖的影響。結果發(fā)現(xiàn)金絲桃素新制劑從50μg.mL-1開始至800μg.mL-1六個濃度均可使小鼠脾臟淋巴細胞顯著增加(P＜0.01)，且具有明顯的劑量依賴關系，可以間接推測金絲桃素新制劑具有一定提高免疫力的功能。 (二)金絲桃素(Hypericin，HY)的化學合成。本研究綜合國內外的文獻資料，對其化學對照品合成路線進行了探索，將一些合成工藝進行了必要的改進，利用1,