“柴芩”注射液的研制及其初步藥效學(xué)研究.pdf

1、本研究針對獸醫(yī)臨床上多見的以發(fā)熱，低溫或寒熱往來，伴隨著食欲減退或者廢絕，精神沉郁為癥狀的不食綜合癥，結(jié)合中獸醫(yī)辯證論治的觀點，通過建立少陽證病理模型，對和法的經(jīng)典方劑小柴胡湯進(jìn)行拆方研究，制備“柴芩”中藥注射液，并對該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)以及藥效學(xué)展開了研究，其結(jié)果如下：
　　 1、以40、80、160μg/kg劑量腹腔注射大腸桿菌內(nèi)毒素(Lipopolysaccharides，LPS)后，大鼠均表現(xiàn)出較為明顯的三相熱。其中，80μ

2、g/kg劑量的發(fā)熱幅度最大。
　　 2、80μg/kg的LPS造模后，除明顯的三相熱外，大鼠的胃殘留率明顯增加，小腸推進(jìn)率降低，說明少陽證大鼠的胃腸功能減弱，與傷寒論中描述的小柴胡證中“嘿嘿不欲飲食”之癥相符。白細(xì)胞數(shù)在體溫降低的同時升高，淋巴細(xì)胞數(shù)升高，一定程度上反映了少陽證中正邪抗?fàn)幍臓顟B(tài)。血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)，堿性磷酸酶(AKP)，總膽紅素(TBil)和膽汁酸(TBA)升高，印證了少陽證的病位在肝膽，與“胸脅苦滿”之癥

3、相符。經(jīng)小柴胡湯反證后，各指標(biāo)除TBil和TBA變化不明顯外，均與正常對照組差異不顯著(P＜0.05)，淋巴細(xì)胞和白細(xì)胞數(shù)增多。
　　 3、8組拆方對少陽證的藥效研究表明，各組均能降低少陽證大鼠血清中較高的ALT和AKP，除柴胡、黃芩和生姜組降溫作用相對全方組較差外，其他各拆方組均能有效降低少陽證大鼠的發(fā)熱，與全方組無顯著性差異(P＜0.05)。說明柴胡和黃芩組合能在一定程度上達(dá)到與小柴胡湯相近的藥效，故將該組方定為注射劑的處方

4、。
　　 4、高效液相色譜法檢測“柴芩”注射液中柴胡皂甙A和黃芩苷的含量。黃芩苷檢測的色譜條件為：色譜柱：HypersilODS，5μm,4.6×250mm:檢測器：紫外檢測器；流動相：甲醇：水：磷酸(45:55:0.2，V/V)；流速：1mL/min；柱溫：35℃；UV檢測波長：278nm;進(jìn)樣量：10μL。精密量取樣品溶液1mL置于100mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，混合均勻，0.45μm的濾膜過濾，取10μL進(jìn)樣，對照

5、標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出含量。柴胡皂甙A檢測的色譜條件為：色譜柱：HypersilODS，5μm，4.6×250mm:檢測器：紫外檢測器：流動相：甲醇：水(75:25，V/V);流速：1mL/min:柱溫：35℃；UV檢測波長：208nm:進(jìn)樣量：10μL。檢測方法為：樣品溶液經(jīng)0.45μm的濾膜過濾，取10μL進(jìn)樣檢測，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出含量。該方法具有穩(wěn)定、可靠、重現(xiàn)性高、回收率高、結(jié)果準(zhǔn)確等特點，可作為該制劑含量檢測的方法。