苦豆子總堿提取與注射液制備及藥效學(xué)研究.pdf

1、苦豆子是我國常用的傳統(tǒng)中藥，屬豆科槐屬植物，味苦性寒，早在《神農(nóng)本草經(jīng)》中就有記載，有清熱燥濕、祛風(fēng)殺蟲、利尿抑菌、抗心律失常的功效，主要分布于我國西北省區(qū)?？喽棺又懈缓喾N化學(xué)成分，目前，作為藥品開發(fā)，國內(nèi)外研究的重點均在生物堿上?，F(xiàn)代藥理學(xué)證實，苦豆子生物堿具有抗病毒、抗炎、抗變態(tài)反應(yīng)、抗?jié)儭⑸甙准毎?、抗癌、平喘、止痛等作用。臨床研究表明，苦豆子生物堿對各種細菌、真菌及病毒都有較強的殺滅作用?？喽棺由飰A的藥用價值已被醫(yī)藥界所公

2、認和重視。目前，鑒于苦豆子生物堿制劑已廣泛應(yīng)用于人醫(yī)臨床，但在治療動物疾病的研究方面尚處于起步階段，該論文通過對苦豆子生物堿的提取、苦豆子總堿注射液的制備及藥效學(xué)三方面研究，達到在獸醫(yī)臨床開發(fā)和應(yīng)用苦豆子的目的。
　　 首先采用酸水浸提法和醇酸浸提法兩種提取工藝分別對苦豆子中的生物堿進行提取，考察了提取過程中的主要因素對提取率的影響。從性狀、鑒別、檢查、含量等指標開展苦豆子總堿質(zhì)量控制方法的建立。用薄層色譜法對苦參堿、氧化苦參堿

3、及槐定堿進行鑒別，并對不同的色譜條件進行了考察。建立了包括干燥失重和重金屬及砷鹽兩項測定的檢查項。用酸性染料分光光度法進行苦豆子總堿的含量測定，用高效液相色譜法測定了指標成分苦參堿及氧化苦參堿的含量。制備了4%的苦豆子總堿注射液，通過對注射液的性狀、可見異物、pH、含量測定、熱原、無菌等方面的考察，制訂了質(zhì)量控制標準?？疾炝丝喽棺涌倝A注射液的穩(wěn)定性，進行了影響因素試驗、加速試驗及長期試驗(12個月)?？疾炜喽棺涌倝A注射液對大腸桿菌、金黃

4、色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及鏈球菌的體外抑菌效果。用大腸桿菌建立了大鼠臨床型乳腺炎疾病模型，給予不同劑量的苦豆子總堿注射液治療后，以乳汁體細胞數(shù)及臨床指標評價治療效果。以腹腔注射方式給予小鼠不同劑量的苦豆子總堿后，確定苦豆子總堿對小鼠腹腔注射的LD50。
　　 結(jié)果表明，苦豆子經(jīng)酸水提取法提取，提取物得率5.07%，提取物中的苦豆子總堿含量61.21%，苦參堿和氧化苦參堿總量為17.08%；經(jīng)醇酸浸提法提取，提取物得率5.19%左

5、右，提取物中苦豆子總堿含量約64.76%，苦參堿和氧化苦參堿總量約為19.89%。兩種提取方法得率相當，醇酸浸提法對大生產(chǎn)要求及成本較酸水提取法高，認為酸水浸提法較醇酸浸提法較為合理和實用。制訂了苦豆子總堿的質(zhì)量控制標準，用薄層色譜法、紫外分光光度法及高效液相色譜法測定苦豆子總堿的含量，提取物干燥失重、重金屬及砷鹽檢查符合規(guī)定，形成了苦豆子總堿的質(zhì)量標準草案。制備了4%的苦豆子總堿注射液，通過檢查、鑒別、含量測定相關(guān)項的結(jié)果制訂了4%的

6、苦豆子總堿注射液的質(zhì)量標準草案。穩(wěn)定性試驗表明苦豆子總堿注射液的穩(wěn)定性較好，暫定藥品有效期為1年。體外抑菌試驗顯示，苦豆子總堿注射液對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及鏈球菌最低抑菌濃度為3.13～12.5mg/mL，耐藥株與敏感株MIC值無差別。用60mg/kg劑量給予模型鼠肌肉注射4%的苦豆子總堿注射液治療，有效率為70%，治愈率為50%，且急性毒性試驗確定苦豆子總堿對小鼠通過腹腔注射的LD50為490.35mg/kg，說明4