抗仔豬病毒性腹瀉IgY微膠囊的制備及效果評價.pdf

1、仔豬腹瀉是目前嚴重危害我國養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的主要疾病，引起仔豬腹瀉的病毒源主要是豬傳染性胃腸炎病毒(Poorcine transmissibLe gastroenteritis，TGEV)、豬流行性腹瀉病毒(Poricine epidemic diarrhoea，PEDV)和輪狀病毒(Rotavirus，RV)。通過本實驗制備抗仔豬病毒性腹瀉的高免全蛋粉和明膠．海藻酸-IgY微膠囊發(fā)揮被動免疫作用，對該病進行預防及治療。
　　 1、采

2、用豬流行性腹瀉、傳染性胃腸炎、輪狀病毒油乳苗（以下簡稱‘三聯(lián)苗’）與不同的佐劑混合免疫雞群的方法。間接ELISA檢測結果：佐劑中添加胸腺肽免疫組免疫效果明顯優(yōu)于僅用油佐劑免疫組，其產生的IgY效價高且持續(xù)時間長。先用弱毒苗做基礎免疫，再用油佐劑苗加強免疫效果明顯優(yōu)于僅用油佐劑苗免疫組。因此，以弱毒苗進行基礎免疫，再用胸腺肽油佐劑苗進行加強免疫是制備IgY的最佳方法。
　　 2、利用噴霧干燥技術制備微膠囊及高免全蛋粉，通過對噴霧干

3、燥工藝條件的優(yōu)化，獲得制備微膠囊最佳工藝為：進風溫度170℃、進料速度10 mL/min、干燥速度lOs、出口溫度70℃；制備高免全蛋粉最佳工藝為：進風溫度180℃、進料速度10mL/min、干燥速度5s、出口溫度70℃，在上述條件下制備微膠囊及高免全蛋粉，性狀最好且IgY活性保持較高水平。
　　 為保護IgY口服時不受酸、堿及胃蛋白酶的破壞，本試驗選用天然材料明膠和海藻酸鈉作為壁材，按上述篩選噴霧干燥的最佳工藝，研究制各明膠．

4、海藻酸鈉-IgY微膠囊的成囊條件。經篩選優(yōu)化確定微膠囊成囊的最佳條件為：明膠濃度4％，海藻酸鈉0.75％，Tween-801％，成囊溶液pH值4.0。以此條件制備微膠囊的包封率為75％，IgY活性保持在80％以上。通過人工胃腸液的體外釋放試驗表明，微膠囊在人工胃液2h的釋放率不超過10％，人工腸液4h的釋放率達到超過80％。采用間接ELISA方法和SDS-PAGE電泳對微膠囊中IgY結構和活性進行檢測，結果顯示，微膠囊通過人工胃液再進入