丹參種質(zhì)多成分評價及丹參四個關(guān)鍵酶基因不同組織表達(dá)分析.pdf

1、本論文包括兩部分內(nèi)容：(1)建立了同時對丹參中的2個脂溶性成分和3個水溶性成分進(jìn)行含量測定的簡單準(zhǔn)確的高效液相色譜方法，運(yùn)用該方法分析了丹參11個無性系材料中5種活性成分的含量，比較了丹參木質(zhì)部和皮部、不同根徑粗細(xì)以及不同根色中這5種成分的含量；(2)運(yùn)用熒光定量PCR法對丹參酮類生物合成途徑中的SmAACT、SmDXR、SmHMGR和SmCPS四個基因在丹參不同器官中的表達(dá)進(jìn)行了分析。
　　 主要研究內(nèi)容：①綜述了丹參的化學(xué)成

2、分和丹參酮類化合物生物合成途徑關(guān)鍵酶基因的研究現(xiàn)狀；②建立了同時測定2種脂溶性成分和3種水溶性成分的HPLC方法，所建方法重復(fù)性、精密度和穩(wěn)定性良好；③對不同產(chǎn)地、不同種質(zhì)丹參進(jìn)行品質(zhì)分析；④對丹參不同部位、不同根莖粗細(xì)以及不同根色進(jìn)行研究；⑤通過熒光定量PCR對SmAACT、SmHMGR、SmDXR和SmCPS4個基因的表達(dá)進(jìn)行研究。
　　 研究結(jié)果表明：丹參無性系材料中脂溶性成分和水溶性成分含量有較大差別，江蘇野生(DC00

3、3)、河南野生(DC004)和河南禹州(DC007)三個地區(qū)樣品水溶性總含量比較高；河南禹州(DC007)樣品脂溶性成分總含量最高，對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析結(jié)果顯示，不同無性系材料丹參素、丹酚酸B和丹參酮ⅡA的含量達(dá)到顯著性差異。DC003、DC004、DC007這三個品系可以作為原始材料來進(jìn)行雜交以篩選出水溶性和脂溶性成分均較高的丹參種質(zhì)；對丹參不同部位、不同根莖粗細(xì)以及不同根色的研究結(jié)果顯示：皮部中丹參素、丹酚酸B、隱丹參酮、丹參酮ⅡA含

4、量均高于木質(zhì)部；丹參根直徑越細(xì)，隱丹參酮和丹參酮ⅡA含量越高，但丹酚酸B含量越低，而原兒茶醛的含量在蘆頭中含量最高；丹參根粉末顏色越趨近紅色，而且顏色越深，其脂溶性成分含量就越高，水溶性成分含量也較高。另外從4個基因的表達(dá)結(jié)果推測SmCPS在丹參酮類化合物生物合成途徑中起調(diào)控作用。
　　 本文建立了同時測定丹參中的3種水溶性成分和2種脂溶性成分的方法，為多組分評價不同來源丹參藥材質(zhì)量提供了一種快速方法。應(yīng)用該方法對丹參不同種質(zhì)不