植物源性物質(zhì)對生長湖羊瘤胃發(fā)酵和肉品質(zhì)的影響及其作用機(jī)理的研究.pdf

1、植物源性物質(zhì)由于含有多種具有抗菌、抗氧化等生物活性成分而越來越受到動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)家的關(guān)注。本研究以皂甙類物質(zhì)茶皂素、富含不飽和脂肪酸的豆油和含有黃酮類和揮發(fā)油類物質(zhì)的杭白菊莖葉等植物源性物質(zhì)為材料，分三部分六個(gè)試驗(yàn)研究了其對湖羊斷奶羔羊胴體品質(zhì)、瘤胃發(fā)酵以及肌肉脂肪酸組成的影響，并利用熒光定量PCR等分子生物學(xué)技術(shù)，研究瘤胃微生物數(shù)量的變化以及與肌肉脂肪酸合成相關(guān)酶基因mRNA豐度的變化，揭示植物源性物質(zhì)影響湖羊肌肉脂肪酸組成的機(jī)理。

2、>　　 第一部分植物源性物質(zhì)對生長湖羊胴體品質(zhì)的影響（試驗(yàn)一和試驗(yàn)二）
　　 試驗(yàn)一研究了日糧中添加茶皂素和豆油對生長湖羊血清生化指標(biāo)和胴體品質(zhì)的影響。選擇健康湖羊斷奶羔羊32只(14.2±1.38kg)，隨機(jī)分為四個(gè)日糧處理組：不加茶皂素也不加豆油組(NTNS):茶皂素組(TS)：豆油組(SO)；茶皂素和豆油混合添加組(TS-SO)。試驗(yàn)采用二因素隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)。茶皂素的添加量為每只羊3g/d，豆油的添加量為日糧干物質(zhì)的3％。

3、動(dòng)物接近自由采食，但在組間控制采食量，以減少因采食和增重差異造成的肉質(zhì)差異。飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，將羊放入呼吸代謝室進(jìn)行甲烷測定。甲烷排放測定結(jié)束后，所有動(dòng)物頸靜脈采血，用于測定血清生化指標(biāo)。然后每組取4組羊進(jìn)行屠宰試驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，TS和SO的添加可顯著降低甲烷的產(chǎn)量(P＜0.05)，與NTNS組相比，TS，SO和TS-SO組每千克干物質(zhì)采食量所產(chǎn)生的甲烷量分別降低了27.7％，18.9％和13.9％。添加TS對羔羊血清生化指標(biāo)不產(chǎn)生顯著影響

4、，但是SO和TS-SO組的總蛋白，高密度脂蛋白膽固醇，膽固醇和游離脂肪酸的含量顯著高于NTNS組，葡萄糖的含量則顯著低于NTNS組(P＜0.05)。SO組的低密度脂蛋白膽固醇含量顯著高于TS組(P＜0.05)。各組間胴體品質(zhì)沒有顯著差異(P＞0.05)。這些結(jié)果表明：添加TS和SO可顯著降低甲烷排放，減少飼料能的損失，但對羔羊胴體品質(zhì)沒有影響，SO的添加可影響羔羊血清生化指標(biāo)。
　　 試驗(yàn)二研究了杭白菊莖葉對湖羊斷奶羔羊生長性能

5、、血清生化指標(biāo)和胴體品質(zhì)的影響。試驗(yàn)選取健康斷奶湖羊羔羊36只(16±2.6kg)，依據(jù)隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)和同欄大小相近原則，根據(jù)體重分成4個(gè)處理，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)（欄），每個(gè)欄3只羔羊。試驗(yàn)采用精粗比為30:70的全混合顆粒飼糧，四組粗料中稻草和杭白菊莖葉(CSL)的比例分別為70:0(CSL0)，45:25(CSL25)，25:45(CSL45)和0:70(CSL70)。試驗(yàn)結(jié)果，隨著CSL飼喂比例的增加，羔羊的平均日增重增加，血清尿素氮

6、(BUN)含量提高，CSL0.組和CSL70組間差異達(dá)顯著水平(P＜0.05)。CSL對羔羊血清過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力、總抗氧化能力(T-AOC)和血清丙二醛(MDA)含量均有不同程度的影響。隨著CSL飼喂比例增加，羔羊血清中CAT和T-AOC增加，CSL45組和CSL70組與CSL0組相比，差異顯著(P＜0.05)；CSL45組GSH-Px活力顯著高于其余各組(P＜0.05)；MDA隨CSL飼喂比

7、例的增加而減少，CSL0和CSL70組間差異顯著(P＜0.05)。CSL的飼喂對羔羊胴體品質(zhì)不存在顯著影響，但是屠宰率CSL70組顯著高于CSL0組(P＜0.05)。上述結(jié)果表明，CSL用作粗料飼喂斷奶湖羊可以提高抗氧化能力，促進(jìn)生長。
　　 第二部分植物源性物質(zhì)對生長湖羊瘤胃發(fā)酵的影響（試驗(yàn)三和試驗(yàn)四）
　　 試驗(yàn)三研究茶皂素和豆油對羔羊瘤胃發(fā)酵參數(shù)以及瘤胃微生物區(qū)系的影響。待飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，動(dòng)物屠宰后取瘤胃液樣品，測

8、定瘤胃發(fā)酵參數(shù)及瘤胃微生物區(qū)系。結(jié)果顯示：與NTNS組相比，TS，SO和TS-SO組的瘤胃pH值均顯著降低(P＜0.05)。添加TS和SO顯著提高總揮發(fā)性脂肪酸(VFA)含量(P＜0.05)，但是對單獨(dú)的VFA不存在顯著影響(P＞0.05)。氨態(tài)氮的含量在SO和TS-SO組顯著低于NTNS組(P＜0.05)，但是TS組變化不大。與NTNS組相比，TS，SO和TS-SO組的微生物蛋白的含量均顯著提高。添加TS和SO對真菌數(shù)量沒有顯著影響(

9、P＞0.05)，TS作為主效應(yīng)對原蟲數(shù)量影響不顯著，但是通過二次分析發(fā)現(xiàn)，TS對原蟲的作用取決于SO，單獨(dú)添加效果是顯著的(P=0.04)，但是與SO同時(shí)添加效果則不顯著(P=0.68)。添加SO顯著降低甲烷菌的數(shù)量(P＜0.05)。SO的添加顯著降低黃色瘤胃球菌和產(chǎn)琥珀酸絲裝桿菌的數(shù)量(P＜0.05)，但是TS對這兩個(gè)纖維菌沒有影響。從DGGE圖譜來看，日糧中添加TS和SO對瘤胃細(xì)菌、原蟲以及甲烷菌區(qū)系有一定的影響，但是各組間條帶數(shù)、

10、多樣性指數(shù)不存在顯著差異(P＞0.05)。結(jié)論：添加茶皂素和豆油對羔羊瘤胃微生物數(shù)量和微生態(tài)區(qū)系均有一定影響。
　　 試驗(yàn)四研究杭白菊莖葉對湖羊瘤胃發(fā)酵參數(shù)以及氫化相關(guān)微生物的影響。瘤胃液取自試驗(yàn)二。試驗(yàn)結(jié)果顯示：CSL70組湖羊瘤胃氨態(tài)氮的含量顯著高于其余各組(P＜0.05)，微生物蛋白的含量CSL45組和CSL70組顯著高于CSL0組和CSL25組(P＜0.05)。瘤胃液相中，CSL的飼喂降低瘤胃原蟲的數(shù)量，且在CSL0組和

11、CSL70組間差異達(dá)顯著(P＜0.05)；溶纖維丁酸弧菌的數(shù)量CSL25組顯著高于CSL0組和CSL70組(P＜0.05)；蛋白溶解梭菌的數(shù)量CSL45組顯著高于CSL0組(P＜0.05)。瘤胃固相中，瘤胃原蟲的數(shù)量也隨著CSL的飼喂而減少，CSL0組和CSL45組間差異顯著(P＜0.05)；溶纖維丁酸弧菌的數(shù)量CSL0組顯著高于CSL70組(P＜0.05)，但是蛋白溶解梭菌沒有顯著的變化。結(jié)果表明，杭白菊莖葉可影響瘤胃氨態(tài)氮和微生物蛋

12、白的含量，以及瘤胃氫化菌的生長，這些影響可能與其所含有的黃酮類和揮發(fā)油類物質(zhì)相關(guān)。
　　 第三部分植物源性物質(zhì)對生長湖羊肌肉脂肪酸組成及相關(guān)酶基因表達(dá)的影響（試驗(yàn)五和試驗(yàn)六）
　　 試驗(yàn)五研究茶皂素和豆油對羔羊肌肉脂肪酸組成以及相關(guān)酶基因表達(dá)的影響。肝臟和肌肉樣品取自試驗(yàn)一。試驗(yàn)結(jié)果顯示：與NTNS組相比，各處理組肌肉組織中飽和脂肪酸(SFA)含量均有所降低，其中TS組和TS-SO組的C14∶0與C15∶0達(dá)顯著水平(P

13、＜0.05)。各處理組肌肉組織中不飽和脂肪酸(UFA)的含量均有所增加，t11C18∶1顯著高于NTNS組(P＜0.05)；SO組的cis-9，trans-11共軛亞油酸(CLA)顯著高于其余各組(P＜0.05)；SO組的多不飽和脂肪酸(PUFA)高于NTNS組(P＜0.05)。日糧中添加TS和SO對羔羊肝臟中脂蛋白酯酶(LPL)基因的mRNA豐度不存在顯著影響(P＞0.05)，但與NTNS組相比，TS和SO組肝臟組織中硬脂酰輔酶A去飽

14、和酶(SCD)基因的mRNA豐度降低(P＜0.05)。與NTNS組相比，TS和SO組肌肉組織中LPL基因mRNA豐度顯著上升(P＜0.05)，且顯著高于TS-SO組。肌肉組織中SCD基因mRNA豐度在SO組的表達(dá)顯著高于其余各組(P＜0.05)。因此推測添加SO對肌肉組織cis-9，trans-11CLA的影響受到SCD基因的調(diào)控。
　　 試驗(yàn)六研究杭白菊莖葉對羔羊皮下脂肪和肌肉脂肪酸組成以及乙酰輔酶A羧化酶(ACC)基因在肝臟

15、、皮下脂肪和肌肉組織中表達(dá)的影響。肝臟、皮下脂肪和肌肉樣品取自試驗(yàn)二。結(jié)果顯示：飼喂CSL可以提高羔羊皮下脂肪C16∶1的含量，其中與CSLO組相比，CSL25組達(dá)顯著水平(P＜0.05)。C18∶2的含量在CSL70組含量最高，顯著高于CSLO組和CSL45組。總飽和脂肪酸和總不飽和脂肪酸隨著CSL飼喂比例的增加而降低和增加，其中在CSLO組和CSL70組間差異達(dá)顯著水平(P＜0.05)。而飼喂CSL對羔羊肌肉中總不飽和脂肪和總飽和脂

16、肪酸均沒有顯著影響(P＞0.05)。CSL對肝臟、皮下脂肪和肌肉組織中ACC基因的表達(dá)均不存在顯著影響(P＞0.05)。ACC基因在肝臟中的表達(dá)量較少，比在脂肪和肌肉組織中表達(dá)量小2個(gè)數(shù)量級。結(jié)果表明：杭白菊莖葉的飼喂可影響動(dòng)物脂肪和肌肉組織中脂肪酸的組成，但對ACC基因的表達(dá)沒有影響。
　　 綜上所述，茶皂素和豆油的添加可以降低湖羊羔羊甲烷排放，從而減少飼料能的損失。日糧中添加茶皂素可能通過降低原蟲數(shù)量從而降低羔羊肌肉組織中C