桔梗皂苷D對腫瘤疫苗的佐劑作用研究.pdf

1、作為醫(yī)治癌癥的第四大療法之一，腫瘤疫苗投入臨床使用的前景非?？捎^，但是新興手段制備的疫苗存在工序復(fù)雜、前期投入較大、產(chǎn)物不穩(wěn)定等因素。因此，考慮到抗原來源和免疫原性等問題，尋找合適佐劑用于腫瘤全細(xì)胞疫苗不失為一種較好的途徑，尤其對于小范圍、個體性腫瘤治療和研究具有積極意義。
　　 桔梗皂苷D(Platycodin，PD)是桔梗Platycodon grandiflorum A.DC.中篩選得到的主要的免疫佐劑活性皂苷化合物。其對

2、卵白蛋白(OVA)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和禽流感新城疫重組二聯(lián)活疫苗(rL-H5)均具有顯著的佐劑作用，且安全性優(yōu)于目前公認(rèn)的皂苷佐劑Quil A。本實驗研究PD對小鼠H22肝癌全細(xì)胞苗免疫小鼠在腫瘤生長、細(xì)胞免疫和體液免疫應(yīng)答上的影響，評價其對腫瘤疫疫苗的佐劑效應(yīng)和作用特點，探討其在腫瘤疫苗中應(yīng)用前景。
　　 以Quil A(20μg)為佐劑對照，小鼠H22肝癌細(xì)胞凍融裂解物(H22瘤苗)聯(lián)合桔梗皂苷D(10μg、2

3、5μg、50μg)皮下注射免疫ICR小鼠。同時，設(shè)未免疫的模型對照組和抗原單獨免疫對照組。首免一周后加強免疫。二免后7天，每鼠左前肢腋下接種H22細(xì)胞懸液0.2 mL。接種瘤液10天后，取瘤組織稱重，計算抑瘤率；無菌條件下取脾臟，制備脾細(xì)胞懸液，檢測脾細(xì)胞增殖反應(yīng)、自然殺傷細(xì)胞(NK)活性、細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)活性、腫瘤抗原特異性CTL(sCTL)活性以及脾細(xì)胞培養(yǎng)上清中γ干擾素(IFN-γ)含量。
　　 PD聯(lián)合H22

4、瘤苗免疫小鼠的瘤重顯著小于瘤苗單獨免疫組和Quil A對照組(P<0.05、P<0.01或P<0.001)，說明PD對H22瘤苗抑制腫瘤生長具有顯著的佐劑作用，且活性優(yōu)于Quil A。PD能顯著促進Con A和LPS刺激的H22瘤苗免疫小鼠脾細(xì)胞增殖反應(yīng)(P<0.05、P<0.01或P<0.001)，活化瘤苗免疫小鼠T、B淋巴細(xì)胞；PD也能顯著提高免疫小鼠NK細(xì)胞、CTL和sCTL細(xì)胞的活性(P<0.01或P<0.001)，增強免疫小鼠

5、對腫瘤細(xì)胞的特異性和非特異性殺傷作用。此外，PD尚能顯著促進免疫小鼠脾細(xì)胞分泌IFN-γ的能力(P<0.05或P<0.01)，誘導(dǎo)免疫小鼠產(chǎn)生Th1免疫應(yīng)答。
　　 綜上所述，PD能促進H22瘤苗小鼠特異性和非特異性、體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答反應(yīng)，增強H22瘤苗對小鼠移植性H22肝癌生長的抑制作用，對H22肝癌全細(xì)胞苗具有顯著的佐劑作用。PD安全性好、性質(zhì)穩(wěn)定、原植物資源豐富、制備工藝簡單。因此，PD作為腫瘤疫苗的佐劑值得進一步深