大豆凝集素糖配體的篩選及其對(duì)體內(nèi)結(jié)合率的影響.pdf

1、根據(jù)已有研究結(jié)果和化學(xué)結(jié)構(gòu)相似原則，通過(guò)理論分析選擇了17種與D-半乳糖結(jié)構(gòu)相近的化合物作為大豆凝集素的潛在配體，試圖采用紅細(xì)胞凝集法從中篩選與大豆凝集素親和力較高的配體，研究其對(duì)大豆凝集素與小腸上皮細(xì)胞體內(nèi)結(jié)合率的影響。并比較溫濕處理?xiàng)l件對(duì)大豆凝集素殘留率和凝血能力的影響。本試驗(yàn)分為三個(gè)部分： 首先，大豆凝集素高親和力糖配體的篩選。以2％兔血紅細(xì)胞懸液為材料，采用凝集試驗(yàn)法，判斷抑制SBA凝集兔血紅細(xì)胞的最低糖配體濃度，比較了

2、17種潛在配體與sBA的親和力。結(jié)果表明，N-乙酰-D-半乳糖胺在0.39 mmol/L時(shí)就可以起到抑制作用，抑制效果最好。D-半乳糖在3.13 mmol/L時(shí)才起到抑制作用。半乳糖胺在12.5 mmol/L時(shí)才起到抑制作用。木糖、甘露醇、蔗糖、果糖、葡萄糖、鼠李糖、山梨糖在500 mmol/L時(shí)才起抑制作用。肌醇、三噁烷、1，4-二羥基-2，3-二噁烷、1，4二羥基-2，5二噁烷、赤蘚糖、麥芽糖、山梨醇對(duì)SBA的凝血活性沒(méi)有抑制作用。

3、 其次，將篩選出的N-乙酰-D-半乳糖胺和D-半乳糖分別添加到大豆粗提液中，給兔進(jìn)行灌喂，然后取其十二指腸和空腸的上皮細(xì)胞制作懸液，用熒光標(biāo)記的大豆凝集素抗體檢測(cè)上皮細(xì)胞上SBA的結(jié)合比例。結(jié)果表明，添加D-半乳糖和N-乙酰半乳糖胺后，SBA與小腸上皮細(xì)胞的結(jié)合率均有所降低。其中十二指腸段，添加N-乙酰半乳糖胺組與對(duì)照組差異顯著(P<0.05)，其余各組均差異不顯著(P>0.05)。表明添加糖配體后，不同程度地抑制了SBA與小腸

4、上皮細(xì)胞的結(jié)合，N-乙酰-D-半乳糖胺的抑制效果要優(yōu)于D-半乳糖，即抑制能力隨糖配體的親和力增強(qiáng)而增大。同時(shí)，將N-乙酰-D-半乳糖胺和D-半乳糖分別添加到大豆粗提液中，并用酚紅作為指示劑，給兔灌喂，然后分別取其十二指腸、空腸、回腸，測(cè)定其中SBA的存留情況。結(jié)果表明，加入半乳糖和N-乙酰-D-半乳糖胺后，腸道食糜中的SBA存留率均有不同程度提高，其中在空腸、回腸，N-乙酰半乳糖胺組SBA的存留率高于D-半乳糖組，表明N-乙酰-D-半乳

5、糖胺比D-半乳糖對(duì)SBA的凝集活性抑制效果要好。并進(jìn)一步說(shuō)明添加糖配體可以抑制SBA與腸壁組織的結(jié)合，且SBA在消化道中不易被消化破壞。 最后，將風(fēng)干、含水率30％和50％的生大豆粉分別在80、100、120、140℃下烘烤10、20、30 min，然后測(cè)定SBA含量和凝集活性。結(jié)果表明，當(dāng)含水率為50％、溫度為140℃時(shí)，SBA含量降至最低，凝集活性也最低。 通過(guò)以上試驗(yàn)表明，N-乙酰-D-半乳糖胺是17種待選物中與S