柑桔園鏈格孢菌的鑒定與防治.pdf

1、柑桔是世界第一大水果，中國是最重要的原產(chǎn)中心之一，其栽培面積和年產(chǎn)量均居世界第一位。鏈格孢屬真菌是植物重要的病原菌，種類多，寄主范圍廣，對(duì)環(huán)境和基質(zhì)的適應(yīng)性很強(qiáng)，在自然界中廣泛分布。在柑桔園中，鏈格孢菌是一種重要的真菌病害，它侵染柑桔的葉片、莖干和果實(shí)，引起Allbinism白化病，粗皮檸檬鏈格孢葉斑病，鏈格孢莖干底部腐爛病，以及柑桔褐斑病和柑桔黑腐病，導(dǎo)致柑桔產(chǎn)業(yè)損失嚴(yán)重。目前，在中國西南地區(qū)柑桔園中發(fā)現(xiàn)，鏈格孢侵染卡里佐枳橙幼苗的葉

2、片和枝條，引起大量幼苗的猝死，同時(shí)發(fā)現(xiàn)鏈格孢也是金柑流膠的致病菌之一。因此對(duì)柑桔園的鏈格孢菌進(jìn)行致病機(jī)理和藥劑防治的研究將為控制鏈格孢菌的流行奠定基礎(chǔ)。本文針對(duì)柑桔園7株鏈格孢菌的形態(tài)、遺傳多樣性、致病機(jī)理進(jìn)行了研究，測定了20種殺菌劑的室內(nèi)毒力。主要研究結(jié)果如下：
　　 ⑴通過組織分離法得到MP2、MP3、MP4、JG2、JG4、T1-4和T2-37株鏈格孢菌。通過形態(tài)觀察和致病性檢測分析發(fā)現(xiàn)7株鏈格孢菌之間具有一定差異。通過

3、rDNA-ITS測序鑒定，7株鏈格孢菌只能被鑒定到Alternaria sp.。
　　 ⑵過rDNA-ITS序列聚類分析發(fā)現(xiàn)所有菌株被分為兩大支，MP2和MP4與Alternaria tenui、Alternaria astragali、Alternaria sp.OUCMBI101196聚為一支。MP3，JG4，T1-4，T2-3與Alternariaalternate，Alternaria citri，Alternaria

4、longipes等聚為一支。通過RAPD結(jié)果聚類分析發(fā)現(xiàn)7株鏈格孢菌被分為三大支，MP2，MP4和MP3聚為一類，JG4與T1-4和T2-3聚為一類，JG2單獨(dú)聚為一類。綜合rDNA-ITS及RAPD分析結(jié)果，MP2與MP4可能是相似種或相同種，與A.tenui、A.astragali、Alternaria sp.OUCMBI101196較近。MP3，JG4，T1-4，T2-3與A.alternate，A.citri，A.longipe

5、s等有較近的親緣性，可能是相近種。而JG2單獨(dú)為一支，還需進(jìn)一步鑒定。這為柑桔園鏈格孢進(jìn)行進(jìn)一步的分類鑒定，為快速鑒定鏈格孢真菌奠定了基礎(chǔ)。
　　 ⑶通過顏色反應(yīng)，發(fā)現(xiàn)MP3毒素為酮類物質(zhì)與，與已報(bào)道A.citri產(chǎn)生的ACT毒素相似。通過對(duì)MP3毒素處理枳橙葉片細(xì)胞的POD、APX活性和MDA含量進(jìn)行測定，結(jié)果表明，MP3毒素可以造成POD、APX活性下降，MDA含量升高。這表明MP3毒素能夠抑制保護(hù)性酶的系統(tǒng)的作用，使細(xì)胞內(nèi)

6、活性氧清除系統(tǒng)遭到破壞，導(dǎo)致活性氧大量累積，致使質(zhì)膜發(fā)生過氧化反應(yīng)，產(chǎn)生MDA，而且MDA的含量隨著MP3毒素濃度的增加而增加。證明MP3毒素作用位點(diǎn)為質(zhì)膜，這與ACT毒素作用位點(diǎn)是質(zhì)膜相一致。
　　 ⑷選取田間常用的20種殺菌劑，進(jìn)行室內(nèi)毒力測定。結(jié)果表明，各藥劑在不同試驗(yàn)濃度下對(duì)鏈格孢M(jìn)P3菌絲的生長均有不同程度的抑制作用，抑制率與濃度呈正相關(guān)。70％丙森鋅EC50值為0.2475μg/mL，其抑菌效果最好；其次為10％苯醚