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1、甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文極細(xì)鏈格孢菌66kDa激活蛋白的純化、理化性質(zhì)和生物活性分析姓名:李杰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):植物病理學(xué)指導(dǎo)教師:朱建蘭邱德文20080601甘菇農(nóng)業(yè)大學(xué)20儲(chǔ)屆碩士學(xué)位論文AbstractInthisreseal“ch,a66kDaactivatorproteinwasextractedandpurifiedfromtheAlternariatenuissimaThesilverstainingshowedas
2、ingleband,whichverifieditispurityThisproteinbiologicalactivityphysicalcharacterglycoproteinidentificationandMSanalysiswereexecutedtomaketheoreticalfoundationforfurtherresearchonthefunctionmechanismofthisprotein1Theextrac
3、tandpurificationof66kDaactivatorproteinfromAlternariatenuissimaThesuitablebufferforextractionandconservationofthisproteinw雒screenedfromGoodbuffersystemThemostnucleicacidintheextractwasremovedbyprotaminePigmentwaseffectua
4、llyabsorbedbyactivecarbonTheprimaryfractionationextractWasdonebyethanolprecipitationandthefollowingpurificationwasexecutedbyDEAEanionexchangechromatographyAfterdesaltingbyHiprepTMDesaltingcolumnandconcentratedbyultrafiRr
5、ation,asinglebandWasdetectedbySDSPAGEandsilverstaining2The66kDaactivatorproteinphysicalandchemicalcharactersTheapparentmolecularweightofthisproteinwas66kDaonSDS—PAGEThePIofthisproteinwasabout427on2D—electrophoresisThepro
6、teinwastreatedby100℃boilingbatheandthencooleddowntoroomtemperatureTheSDS—PAGEdetectionofthetreatedproteinverifiedthisproteinWasathermostableprotein3The66kDaactivatorproteinglyeoproteinidentificationTheglycoproteinspecifi
7、cstainingwasdonewitllhorseradishperoxidaseaspositivecontrolandsoybeantrypsinasnegativecontrol,andtheresultshowed66kDaproteinwasaglycoprotein4The66kDaactivatorproteinbiologicalactivitydeterminationTheTMVresistanceassaywas
8、respectivelydonebytreatingtobacumSamsun、Ⅳith41xg/mL,61xg/mL,8Itg/mLproteinsolutionandmechanicalinoculationafter72hourneresultWasthatthe8pg/mLproteinsolutionhadanecrosisinhibitrateat49%Wheatseedswerealsotreatedby8pg/mLand
9、thenculturedrespectivelyatroomtemperatureandlowtemperatureof15“CTheaverageplantheightdetectionwasdoneafter5daysandthetreatmentandcontrolatroomtemperaturewere987cmand982cm,whichhadnoobviousdifferenceButthetreatmentandcont
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