即時浸酸和低溫冷藏對滯育蠶卵輔酶Ⅰ和Ⅱ代謝的影響.pdf

1、家蠶是典型的胚胎滯育昆蟲，即時浸酸和低溫冷藏可分別阻止滯育發(fā)動和解除滯育狀態(tài)。滯育發(fā)動時呼吸耗氧量顯著下降，糖原大量轉(zhuǎn)化為山梨醇，同時細(xì)胞停止分裂。即時浸酸顯著提高了其呼吸耗氧量，抑制了山梨醇積累，細(xì)胞繼續(xù)分裂。低溫冷藏期間，呼吸耗氧量保持于極低水平，山梨醇重新轉(zhuǎn)換為糖原，細(xì)胞不能分裂。在低溫解除滯育后，呼吸耗氧量迅速上升，細(xì)胞分裂恢復(fù)。輔酶I NAD(H)和輔酶Ⅱ NADP(H)分別參與細(xì)胞的能量代謝和還原性生物合成及抗氧化。NAD激

2、酶(NAD kinase，NADK)能夠催化NAD(H)生成NADP(H)。蘋果酸脫氫酶(malate dehydrogenase，MDH)和乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)是胞漿中催化NADH氧化的關(guān)鍵酶。6-磷酸葡萄糖脫氫酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase，G6PDH)和異檸檬酸脫氫酶（isocitrate dehydrogenase，ICDH）是胞漿中催化NADP

3、還原的關(guān)鍵酶。鑒于滯育蠶卵中呼吸耗氧量和糖原-山梨醇相互轉(zhuǎn)化可能與NAD(H)和NADP(H)代謝相關(guān)，本研究測定了即時浸酸和低溫冷藏對滯育蠶卵中NAD(H)和NADP(H)代謝的影響。主要結(jié)果如下:
　　 一、即時浸酸對滯育蠶卵中NAD(H)和NADP(H)代謝的影響
　　 滯育發(fā)動階段，蠶卵中NAD(H)含量、NADP(H)含量和NADK活性顯著下降，表明NAD和NADP的降解大于合成，NAD(H)含量下降導(dǎo)致呼吸耗

4、氧量顯著降低，NAD降解產(chǎn)物可能參與了細(xì)胞分裂抑制;同時，盡管NADH/NAD比值在產(chǎn)下后36h左右達(dá)到峰值，但是MDH活性無顯著變化，LDH活性顯著下降，表明NADH氧化減弱;另外，盡管NADPH/NADP比值處于波動中，但是ICDH活性無顯著變化，G6PDH活性顯著下降，表明NADP還原減弱。
　　 即時浸酸處理后，NAD(H)含量、NADP(H)含量和NADK活性顯著升高，并且顯著高于滯育蠶卵，表明NAD和NADP的合成大

5、于降解，NAD(H)含量顯著升高為呼吸耗氧量迅速增加奠定了基礎(chǔ);同時，NADH/NAD比值處于波動中，MDH活性顯著升高，LDH活性顯著下降，表明胞漿中NADH通過蘋果酸-天冬氨酸穿梭氧化機(jī)制加強(qiáng)；除了產(chǎn)下后36 h外，兩者NADH/NAD比值無顯著差異，即時浸酸蠶卵MDH和LDH活性都顯著高于滯育蠶卵，表明NADH/NAD氧化還原循環(huán)強(qiáng)度與NAD(H)含量變化一致;此外，即時浸酸蠶卵NADPH/NADP比值顯著升高，G6PDH活性無顯

6、著變化，ICDH活性顯著升高，表明NADP還原增強(qiáng)；兩者NADPH/NADP比值無顯著差異，即時浸酸蠶卵G6PDH和ICDH活性都顯著高于滯育蠶卵，表明NADP還原能力與其NADP(H)含量變化一致。
　　 可見，即時浸酸后呼吸耗氧量增加與其NAD(H)含量而不是NADH/NAD比值升高有關(guān)，生物合成和抗氧化能力增強(qiáng)與其NADP(H)含量而不是NADPH/NADP比值升高有關(guān)。
　　 二、低溫冷藏對滯育蠶卵中NAD(H)

7、和NADP(H)代謝的影響
　　 產(chǎn)下后10-90d，滯育卵中G6PDH和ICDH活性顯著提高，其它測定指標(biāo)無顯著變化?？梢?，滯育維持階段蠶卵除了NADPH/NADP氧化還原循環(huán)偏向于還原外，NAD和NADP代謝處于穩(wěn)定狀態(tài)。
　　 低溫處理過程中，NAD(H)含量、NADP(H)含量和NADK活性都顯著升高，而且顯著高于滯育蠶卵，表明NAD和NADP的合成大于降解，NAD(H)含量顯著增加為解除滯育后轉(zhuǎn)移到常溫下呼吸耗

8、氧量迅速升高奠定了基礎(chǔ);在低溫冷藏蠶卵中，盡管NADH/NAD比值無顯著變化，MDH活性顯著升高，但是LDH活性無顯著變化，表明NADH通過蘋果酸-天冬氨酸穿梭氧化機(jī)制加強(qiáng);兩者NADH/NAD比值和LDH活性無顯著差異，但是低溫冷藏蠶卵的MDH活性顯著高于滯育蠶卵，表明低溫處理過程中NADH的氧化增強(qiáng);此外，低溫冷藏蠶卵中NADPH/NADP比值在早期和中期無顯著變化，但是后期迅速升高，而且G6PDH和ICDH活性也顯著升高，表明低溫