PCR_mtDNA技術(shù)鑒別檢測固原雞源性成分的研究.pdf

1、本研究以寧夏地方品種固原雞(白羽、紅羽、麻羽)、引進(jìn)肉雞品種AA雞和蛋用品種羅曼雞為研究對象，利用PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))擴(kuò)增技術(shù)，以GenBank家雞mtDNA(登錄號為：AB003323)全序列為基礎(chǔ)，設(shè)計(jì)用于擴(kuò)增固原雞、AA雞、羅曼雞線粒體DNA控制區(qū)(D-LOOP)、細(xì)胞色素b脫復(fù)輔基酶(Cytb)、細(xì)胞色素C氧化酶亞基I(COI)、12srRNA基因序列限制性片段的特異性引物，并對PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序。通過生物學(xué)軟件對所得序

2、列進(jìn)行比對，分析品種間的遺傳差異，探討線粒體不同基因在鑒別檢測雞品種源性成分利用方面的可行性，篩選出適合鑒別檢測固原雞源性成分的可靠目的基因。研究結(jié)果表明：
　　 1 D-LOOP基因發(fā)現(xiàn)14個變異位點(diǎn)，3個缺失/插入位點(diǎn)及11個轉(zhuǎn)換位點(diǎn)，其中固原雞與AA雞、羅曼雞在品種間發(fā)現(xiàn)6個變異位點(diǎn)；從雞在490位點(diǎn)缺失了一個C堿基，在199位點(diǎn)發(fā)現(xiàn)一個特異性變異位點(diǎn)，發(fā)生了C/T的轉(zhuǎn)換；羅曼雞在860位點(diǎn)發(fā)現(xiàn)一個特異性變異位點(diǎn)，插入了一

3、個C堿基。固原雞三個類群(白羽、紅羽、麻羽)內(nèi)發(fā)現(xiàn)6個變異位點(diǎn)。紅羽在490位點(diǎn)缺失了一個C堿基；白羽在167位點(diǎn)和1217位點(diǎn)發(fā)生了T/C的轉(zhuǎn)換，243位點(diǎn)和256位點(diǎn)發(fā)生了C/T的轉(zhuǎn)換，在15位點(diǎn)發(fā)現(xiàn)一個特異性變異位點(diǎn)，插入了一個A堿基。
　　 2 COI基因在品種間發(fā)現(xiàn)3個變異位點(diǎn)，分別是在114位點(diǎn)和156位點(diǎn)發(fā)生了T/C的轉(zhuǎn)換以及255位點(diǎn)發(fā)生了A/G轉(zhuǎn)換。固原雞三個類群(白羽、紅羽、麻羽)內(nèi)沒有發(fā)現(xiàn)變異位點(diǎn)。