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文檔簡(jiǎn)介
1、牛筋草(Eleusineindica(L.)Gaerth)為一年生禾本科穆屬(Eleusine)植物,是我國(guó)農(nóng)田重要的惡性雜草,具有頑強(qiáng)的生命力和繁殖力。本文應(yīng)用微衛(wèi)星方法對(duì)我國(guó)北京、河南、安徽、山東、浙江和廣東六省市的18個(gè)牛筋草居群進(jìn)行遺傳多樣性分析,對(duì)牛筋草適應(yīng)能力以及分布發(fā)展?jié)摿M(jìn)行初探。本研究結(jié)果如下:
一、利用L16(45)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)和單因素優(yōu)化試驗(yàn)兩種方法,獲得牛筋草ISSR-PCR的最適反應(yīng)體系為:模板D
2、NA80ng,Mg2+1.75mmol/L,dNTP0.4mmol/L,引物0.3μmol/L,TaqDNA聚合酶1U,10×PCRBuffer2.5μL,最后用ddH2O補(bǔ)足至25μL。ISSR-PCR的擴(kuò)增程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性5min;94℃變性30s,退火30s,72℃延伸1min,35循環(huán);72℃延伸10min。
二、利用從30對(duì)引物中篩選出的14對(duì)多態(tài)性高、重復(fù)性好的ISSR引物,在18個(gè)居群中,擴(kuò)增得到158條
3、帶,DNA片段大小分布在150~2000bp之間,其中多態(tài)性條帶146,多態(tài)性百分率為92.41%,每條引物擴(kuò)增位點(diǎn)數(shù)為5~17條不等,平均每對(duì)引物擴(kuò)增14.6個(gè)位點(diǎn)。
三、利用NTSYSpc2.10e生物軟件對(duì)18個(gè)供試牛筋草居群進(jìn)行分析。Jaccard遺傳相似系數(shù)(GS)數(shù)分布在0.3125~0.8750之間,遺傳相似度最大為0.8750,分別為HS和ST,即來自河南商丘和山東泰安兩地的牛筋草居群,顯示出兩地牛筋草基因
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