中國(guó)部分地區(qū)馬鈴薯晚疫病菌的遺傳分化研究.pdf

1、該研究用兩個(gè)馬鈴薯品種:春薯4號(hào)(對(duì)晚疫病高度抗病)和津引8號(hào)(對(duì)晚疫病高度感病)對(duì)采自中國(guó)馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)(河北、云南、四川、黑龍江)的60個(gè)馬鈴薯晚疫病菌菌株進(jìn)行了致病性測(cè)定,結(jié)果表明菌株的致病性、寄生適合度和其地域來源有一定的相關(guān)性,來源于河北的菌株致病性最強(qiáng)、寄生適合度最高;而來源于四川的菌株致病性最弱,寄生適合度也最低;91.30％菌株在春薯4號(hào)上的寄生適合度小于在津引8號(hào)上的寄生適合度.對(duì)晚疫病菌DNA的提取方法進(jìn)行了摸索、改進(jìn)

2、,發(fā)現(xiàn)SDS法更適于提取馬鈴薯晚疫病菌的DNA;用黑麥培養(yǎng)基培養(yǎng)的菌絲最適于提取DNA;新鮮菌絲并不適合于提取DNA,菌絲收集后在-20 ℃冰箱中存放數(shù)天再提取效果最好.建立了適宜于馬鈴薯晚疫病菌擴(kuò)增的最佳RAPD反應(yīng)體系:體系為25 μL,其中含10 ×PCR buffer(含10mmol·L<'-1>MgCL<,2>)2.5μL,Taq酶1.5U,dNTP10 × 10<'-3>μmol,模板DNA 20~80ng,引物10 ×10

3、<'-6>μmol.選用15個(gè)隨機(jī)引物,對(duì)60個(gè)馬鈴薯晚疫病菌菌株進(jìn)行了RAPD分析,每個(gè)引物擴(kuò)增出的條帶數(shù)為4-12條,共擴(kuò)增出106個(gè)RAPD標(biāo)記,其中多態(tài)性標(biāo)記87個(gè),占82.08%.聚類分析結(jié)果表明來源于4個(gè)省區(qū)的菌株間的親緣關(guān)系極為復(fù)雜,菌株間親緣關(guān)系均比較遠(yuǎn).由聚類圖還可看到,對(duì)寄主寄生適合度最大的19個(gè)菌株中有12個(gè)在相似系數(shù)為0.84時(shí)就全部聚在一起,親緣關(guān)系相對(duì)比較近.選用5個(gè)隨機(jī)引物,對(duì)45個(gè)F<,1>代菌株及其親本

4、菌株進(jìn)行了RAPD分析,每個(gè)引物擴(kuò)增出的條帶數(shù)為5-9條,共擴(kuò)增出31個(gè)RAPD標(biāo)記,其中多態(tài)性標(biāo)記26個(gè),占83.87%.通過聚類分析表明F<,1>代的RAPD指紋圖譜和其親本相比變異不太明顯.在0.76的相似系數(shù)下,供試菌株可分為5個(gè)RAPD群,RGs1~RGs5,兩個(gè)親本菌株及大多數(shù)后代菌株(36個(gè))都在RGs5內(nèi),只有9個(gè)后代菌株分散在RGs1~RGs4內(nèi).說明大多數(shù)后代菌株與親本相比變異不太大,只有少數(shù)與親本的親緣關(guān)系比較遠(yuǎn).