休眠誘導(dǎo)期油桃花芽蛋白組和呼吸途徑分析.pdf

1、多年生落葉果樹(shù)冬天會(huì)經(jīng)歷嚴(yán)寒等逆境脅迫，在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中，果樹(shù)形成了以芽體休眠的方式適應(yīng)這種逆境，所以在嚴(yán)冬來(lái)臨前及時(shí)建立起休眠狀態(tài)是芽體發(fā)育中一個(gè)重要階段(休眠誘導(dǎo)期)。在花芽休眠誘導(dǎo)進(jìn)程中，果樹(shù)芽體通過(guò)表達(dá)特異基因來(lái)感受逐漸改變的環(huán)境因子(短日照和低溫)而發(fā)育，使細(xì)胞內(nèi)發(fā)生一系列復(fù)雜而有序的變化從而建立起與生長(zhǎng)期完全不同蛋白質(zhì)組成。本實(shí)驗(yàn)以十年生的曙光油桃花芽為試材，利用雙向電泳和生物質(zhì)譜分析技術(shù)相結(jié)合的方法研究花芽休眠誘導(dǎo)期的三

2、個(gè)發(fā)育階段(Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期)的差異表達(dá)蛋白質(zhì)組并同時(shí)檢測(cè)花芽在這三個(gè)發(fā)育階段的生理生化變化，獲得了如下研究結(jié)果：
　　 1、花芽休眠誘導(dǎo)進(jìn)程中，我們通過(guò)2-DE共發(fā)現(xiàn)了13個(gè)穩(wěn)定的差異表達(dá)的蛋白點(diǎn)，7個(gè)表現(xiàn)出上調(diào)趨勢(shì)，6個(gè)表現(xiàn)出下調(diào)趨勢(shì)；應(yīng)用MS技術(shù)成功鑒定出其中的11個(gè)蛋白點(diǎn)，將它們進(jìn)行功能分類(lèi)后，發(fā)現(xiàn)上調(diào)的蛋白中6個(gè)屬于脅迫和防御響應(yīng)蛋白類(lèi)，1個(gè)屬于光合作用類(lèi)；而下調(diào)蛋白中的2個(gè)屬于糖酵解和能量代謝類(lèi)，1個(gè)屬于細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和

3、細(xì)胞周期調(diào)控的蛋白類(lèi)，1個(gè)屬于細(xì)胞壁重塑和細(xì)胞壁代謝蛋白類(lèi)。
　　 2、花芽休眠誘導(dǎo)進(jìn)程中，芽體內(nèi)自由水含量逐漸降低，尤其在Ⅲ期含量降低更顯著；芽體內(nèi)H2O2含量先升高后降低，在Ⅱ期出現(xiàn)峰值。
　　 3、花芽休眠誘導(dǎo)進(jìn)程中，芽體總呼吸速率(Vt)下降，三羧酸循環(huán)(TCA)途徑活性降低；磷酸戊糖途徑(PPP)在Ⅱ期下降，在Ⅲ期增加。
　　 4、花芽休眠誘導(dǎo)進(jìn)程中，細(xì)胞色素途徑活性(p'Vcyt)和其占總呼吸活性比值

4、(p'Vcyt/Vt)均降低，但活性高于交替途徑實(shí)際活性(pValt)；交替途徑實(shí)際活性(pValt)和其占總呼吸比值(pValt/Vt)均在Ⅱ期下降，在Ⅲ期增加。
　　 綜上所述，可以發(fā)現(xiàn)油桃花芽休眠誘導(dǎo)進(jìn)程中芽體內(nèi)發(fā)生了復(fù)雜的變化。差異表達(dá)蛋白質(zhì)組實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：Ⅱ期是芽體細(xì)胞分裂和生長(zhǎng)開(kāi)始停止的階段：Ⅲ期是芽體獲得并增強(qiáng)其抗逆能力的關(guān)鍵時(shí)期；呼吸代謝途徑的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：三羧酸(TCA)生化呼吸途徑和細(xì)胞色素途徑活性(p'Vc