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1、本試驗(yàn)通過對(duì)二倍體和三倍體羅漢果果實(shí)內(nèi)源激素含量變化與生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)關(guān)系研究、二倍體和三倍體羅漢果果實(shí)過氧化物酶和酯酶同工酶分析比較、外源激素對(duì)二倍體和三倍體羅漢果果實(shí)生長(zhǎng)特性及品質(zhì)的影響以及二倍體羅漢果LFY同源基因的研究,旨在揭示兩種倍性羅漢果果實(shí)發(fā)育的生理特性與激素調(diào)控效果,為指導(dǎo)高品質(zhì)羅漢果和新品種的選育提供理論基礎(chǔ)??偨Y(jié)結(jié)果如下:
1在羅漢果果實(shí)發(fā)育過程中,二倍體羅漢果內(nèi)源激素IAA、ZR、ABA的含量均明顯高于三倍體
2、羅漢果的,其中ABA含量最高,其含量在兩種倍性的羅漢果整個(gè)生長(zhǎng)期中都遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于其它三種激素。兩種倍性果實(shí)的IAA含量變化趨勢(shì)在整個(gè)生長(zhǎng)期差異很大,在快速生長(zhǎng)的0-24天二倍體的IAA先迅速升高至第6天后又急速下降,三倍體的IAA則先緩慢下降至第12天時(shí)又迅速上升;GA3含量總體呈相反趨勢(shì),二倍體的GA3含量整個(gè)生長(zhǎng)期隨著果實(shí)的膨大而呈下降趨勢(shì),而三倍體的除了在0-6天下降,之后一直上升直至果實(shí)晚熟;ZR含量在前中期有明顯差異但后期趨于相同
3、,在0-24天,二倍體的ZR隨著種子的生成先迅速升高然后又迅速下降,三倍體的先緩慢下降然后迅速升高;而ABA含量變化趨勢(shì)基本沒有差異。
2試驗(yàn)分別對(duì)二倍體、三倍體羅漢果果實(shí)的POD同工酶和EST同工酶進(jìn)行研究和分析,結(jié)果表明:兩種倍性羅漢果的POD和EST同工酶差異很大,其中差異最大的是POD同工酶,所分離的條帶數(shù)不同。從二倍體果實(shí)中一共分離出了9條POD酶帶,其中P7、P8和P9為特異帶,從三倍體果實(shí)中共分離出了10條P
4、OD酶帶,其中p3、p6、p9和p10為特異帶,兩種倍性果實(shí)的差異帶為P4、p3和p4,其中二倍體的P4對(duì)果實(shí)的膨大產(chǎn)生明顯的促進(jìn)作用;從二倍體和三倍體果實(shí)中均分離出10條不同Rf值的酶帶,酶帶的強(qiáng)弱均隨著果實(shí)的發(fā)育呈下降趨勢(shì),其中E1、E3、E7、E9和E10為二倍體羅漢果果實(shí)EST同工酶的特異帶,e1、e3、e5、e6、e9和e10為三倍體的特異帶,兩種倍性羅漢果無EST差異帶,但二倍體的E2和E4在24-50天仍對(duì)果實(shí)的膨大起到較
5、大的促進(jìn)作用。
3運(yùn)用外源激素IAA、GA3、ZR和ABA對(duì)二倍體和三倍體羅漢果果實(shí)發(fā)育進(jìn)行調(diào)控,結(jié)果如下:
影響二倍體和三倍體羅漢果果實(shí)重量和甜苷V含量最顯著的實(shí)驗(yàn)因素均分別為噴灑間隔時(shí)間和噴灑時(shí)間。生產(chǎn)中若以果實(shí)重量為考核指標(biāo),則對(duì)二倍體重量促進(jìn)作用最佳的實(shí)驗(yàn)處理組合為150mg/L的ABA,一級(jí)側(cè)蔓打頂時(shí)開始噴灑,總共噴灑1次,使果實(shí)的重量顯著增加了21.18g,而對(duì)三倍體果實(shí)重量促進(jìn)效果最佳的實(shí)驗(yàn)處理
6、組合為25mg/L的GA3,三級(jí)側(cè)蔓雌花授粉時(shí)開始噴灑,每隔5天噴灑1次,總共噴灑2次,使重量增加了9.74g;若以甜苷V為考核指標(biāo),則對(duì)二倍體和三倍體果實(shí)甜苷V積累效果最顯著的實(shí)驗(yàn)處理組合均為150mg/L的ZR,二級(jí)側(cè)蔓雌花開始發(fā)育時(shí)噴灑,每隔5天噴灑一次,總共噴灑2次,使果實(shí)甜苷V分別升高了22.65%和29.29%。
4本文研究了羅漢果LFY同源基因,得到了兩條分別命名為Sg1-LFY和Sg2-LFY的DNA片段。
7、其中Sg1-LFY長(zhǎng)973bp,包含2個(gè)外顯子(369bp和340bp)和1個(gè)內(nèi)含子(264bp),共編碼236個(gè)氨基酸;Sg2-FLY長(zhǎng)729bp,包含1個(gè)外顯子(310bp)和1個(gè)內(nèi)含子(413bp),編碼101個(gè)氨基酸。經(jīng)BLAST分析表明,兩段序列與其它植物的同源性達(dá)到77%-97%;根據(jù)外顯子序列編碼的氨基酸序列進(jìn)行BLAST分析,結(jié)果表明氨基酸序列與其它20種植物的LFY同源基因的同源性達(dá)高達(dá)73%-97%,說明該基因片段確
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