青蛤養(yǎng)殖環(huán)境異養(yǎng)細(xì)菌菌群和理化因子的檢測與分析.pdf

1、青蛤（Cyclina sinensis)是近年來我國江蘇、浙江、遼寧等地沿海規(guī)?；B(yǎng)殖的一種主要經(jīng)濟(jì)貝類。隨著青蛤養(yǎng)殖歷史的延長、養(yǎng)殖規(guī)模的逐年擴(kuò)大和養(yǎng)殖密度的加大，其養(yǎng)殖環(huán)境日趨惡化，易使病原大量滋生，從而導(dǎo)致青蛤病害問題的發(fā)生，不利于養(yǎng)殖業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。本課題客觀、全面地研究了不同密度下青蛤海水圍塘養(yǎng)殖環(huán)境中異養(yǎng)菌群數(shù)量、群落結(jié)構(gòu)、細(xì)菌多樣性隨時間的變化規(guī)律，提供了評價和預(yù)測青蛤養(yǎng)殖環(huán)境安全性的基礎(chǔ)信息，為維持青蛤養(yǎng)殖環(huán)境生態(tài)平

2、衡提供理論依據(jù)。主要結(jié)果如下：
　　1.青蛤養(yǎng)殖環(huán)境及腔液中異養(yǎng)細(xì)菌和弧菌數(shù)量變化
　　于2013年5月至12月對六個不同密度的青蛤養(yǎng)殖塘進(jìn)行調(diào)查，進(jìn)行了青蛤腔液及養(yǎng)殖環(huán)境包括養(yǎng)殖水體和底泥中異養(yǎng)細(xì)菌數(shù)量、弧菌數(shù)量的動態(tài)變化研究，并探討其與養(yǎng)殖密度間相關(guān)性和樣本間相關(guān)性。結(jié)果表明，實驗采樣周期中各養(yǎng)殖塘水體中異養(yǎng)細(xì)菌數(shù)量呈現(xiàn)不同的變化趨勢且差異性不顯著（F=1.257，p>0.05），而各塘弧菌數(shù)量變化趨勢則較為一致且差異性

3、較為顯著（F=2.673，p<0.05）。采樣周期中各塘底泥中異養(yǎng)細(xì)菌總數(shù)變化和弧菌數(shù)量變化差異性均不顯著，而不同密度養(yǎng)殖塘底泥中弧菌數(shù)量變化差異性顯著（F=2.605，p<0.05）。不同采樣時間同一塘的青蛤腔液異養(yǎng)細(xì)菌總數(shù)具有顯著性差異（F=4.203，p<0.01）,而弧菌數(shù)量差異不顯著（F=2.881，p>0.05）。進(jìn)行樣本間、樣本與密度間相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，水樣中異養(yǎng)細(xì)菌總數(shù)變化與弧菌數(shù)量變化呈正相關(guān)且相關(guān)性顯著（r=0.335

4、*，Sig.=0.020）；底泥中異養(yǎng)細(xì)菌總數(shù)變化與弧菌數(shù)量變化呈正相關(guān)且相關(guān)性極顯著（r=0.587**，Sig.=0）；底泥和水體中異養(yǎng)細(xì)菌總數(shù)和弧菌數(shù)量變化與養(yǎng)殖密度相關(guān)性均不顯著；青蛤腔液異養(yǎng)細(xì)菌總數(shù)變化與養(yǎng)殖密度相關(guān)性極顯著（r=-0.189**，Sig.=000），青蛤腔液弧菌數(shù)量變化與養(yǎng)殖密度相關(guān)性極顯著（r=-0.123**，Sig.=004）。
　　2.青蛤養(yǎng)殖環(huán)境中異養(yǎng)細(xì)菌菌群組成及多樣性分析
　　于20

5、13年5月至12月對青蛤養(yǎng)殖塘水體和底泥中異養(yǎng)菌群多樣性進(jìn)行研究。結(jié)果表明，水體中各塘共同優(yōu)勢菌屬依次為假交替單胞菌（Pseudoalteromonas）、弧菌屬（Vibrio）、交替單胞菌屬（Alteromonas）、Idiomarina、弓形桿菌屬（Arcobacter）、假單胞菌屬（Pseudomonas）、希瓦氏菌屬（Shewanella）、海桿菌屬（Marinobacter）、鹽芽孢桿菌屬（Halobacillus）和海單胞菌

6、屬（Marinomonas），其比例分別為15.48％、7.28％、4.98％、3.87％、3.13％、2.95％、2.03％、1.84％、1.75％、和1.29％。同一養(yǎng)殖塘不同采樣時間優(yōu)勢菌有一定差異。異養(yǎng)細(xì)菌多樣性指數(shù)分析表明，4＃塘的異養(yǎng)菌群群落較豐富，且優(yōu)勢菌群的優(yōu)勢度明顯；5＃塘 Simpson優(yōu)勢度指數(shù)最高，表明5＃塘水體樣本中含有較多的最常見異養(yǎng)菌種類。聚類分析結(jié)果表明2＃塘水樣中菌群結(jié)構(gòu)較為穩(wěn)定。底泥中各塘共同優(yōu)勢菌屬

7、依次為芽孢桿菌屬（Bacillus）、鹽芽孢桿菌屬（Halobacillus）、 Thalassobacillus、弧菌屬（Vibrio）、假交替單胞菌屬（Pseudoalteromonas）、希瓦氏菌屬（Shewanella）、利斯頓菌屬（Listonella）、海桿菌屬（Marinobacter）、 Falsibacillus、 Salirhabdus和葡萄球菌屬（Staphylococcus），其比例分別為31.50％、20.74

8、％、3.51％、2.74％、2.31％、1.43％、1.32％、1.21％、0.88％、0.88％和0.77％。同一養(yǎng)殖塘不同采樣時間優(yōu)勢菌種類保持穩(wěn)定。異養(yǎng)細(xì)菌多樣性指數(shù)分析表明，5＃塘的異養(yǎng)菌群群落較豐富，2＃塘泥體樣本中含有較多的最常見異養(yǎng)菌種類。泥樣聚類分析結(jié)果表明，各養(yǎng)殖塘底泥中的菌群結(jié)構(gòu)相對穩(wěn)定。
　　3.青蛤養(yǎng)殖環(huán)境中理化因子的檢測與分析
　　于2013年5月至2013年12月對六個不同密度的青蛤養(yǎng)殖塘水體和底

9、泥理化因子進(jìn)行調(diào)查研究。結(jié)果表明養(yǎng)殖塘水體中硝酸鹽氮含量變化范圍為0.036mg/L~0.891mg/L，亞硝酸鹽氮含量變化范圍為0.0031mg/L~0.3167mg/L，氨氮含量變化范圍為0.008mg/L~0.777mg/L，底泥中硫化物的含量范圍在6.821mk/kg~206mg/kg，符合國家海洋生態(tài)環(huán)境檢測技術(shù)規(guī)范的規(guī)定。相關(guān)性分析表明，硝酸鹽、亞硝酸鹽和硫化物含量與樣品中異養(yǎng)細(xì)菌總數(shù)和弧菌數(shù)量有一定相關(guān)性，但不顯著；氨氮含