大米源含硒蛋白酶解物的制備及其抗氧化和免疫活性.pdf

1、　　富硒大米中硒主要以硒結(jié)合蛋白形式存在,具有較高的生物活性。本論文以堿法提取大米含硒蛋白并以幾種內(nèi)源酶水解,通過(guò)體外試驗(yàn)測(cè)定了酶解產(chǎn)物的抗氧化活性和免疫活性,分析了酶解產(chǎn)物硒含量與抗氧化和免疫活性的關(guān)系。
　　本文主要結(jié)果有：
　　1. 以含硒蛋白提取率為指標(biāo)篩選出堿法提取含硒蛋白最佳條件：0.07mol/L的NaOH溶液、1：20的料液比、40℃的提取溫度、3h的提取時(shí)間,且證實(shí)了堿法提取大米含硒蛋白的效果優(yōu)于SDS

2、法提取。
　　2. 用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶分別在其最適條件下酶解大米含硒蛋白,發(fā)現(xiàn)胰蛋白酶的酶解產(chǎn)物具有較高的水解度和DPPH自由基清除率。通過(guò)正交試驗(yàn)優(yōu)化篩選出胰蛋白酶水解大米含硒蛋白的最佳條件為：酶比底物濃度：10%,底物濃度：6%,pH：8.5,溫度：50℃。此條件下所得產(chǎn)物(TPH)的水解度為22.69±0.34%,硒含量為0.372±0.031mg/kg,樣品濃度為2.0mg/mL時(shí)DPPH自由基清除率為 7

3、8.19±1.44%。還原能力測(cè)定結(jié)果表明 TPH 具有一定的抗氧化活性。
　　3. 在對(duì)各組大米含硒蛋白水解物的體外細(xì)胞抗氧化活性的研究中發(fā)現(xiàn),蛋白酶水解物具有體外細(xì)胞抗氧化活性,而SDS法提取物沒(méi)有活性。胰蛋白酶水解物抗氧化活性最高。通過(guò)研究大米含硒蛋白酶解物的巨噬細(xì)胞增殖能力和對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬中性紅能力的影響發(fā)現(xiàn),不同酶解方法對(duì)產(chǎn)物的免疫活性強(qiáng)弱有一定影響,且胰蛋白酶水解物具有更高的體外免疫活性。
　　4. 大米含硒