禽白血病凈化中的種公雞檢測及逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑類藥物在降低禽白血病垂直傳播危害中的應用.pdf

1、禽白血病病毒（Avian Leukosis Virus, ALV）自首次被報道以來已在世界各地爆發(fā)和流行，因其高致病性、高致死率、高腫瘤并發(fā)率給各國養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大的損失。ALV主要通過垂直傳播方式呈指數(shù)級擴大，種蛋和精液在病毒垂直傳播過程中起著決定性的作用。在很長的時期內(nèi)，我們主要通過檢測母雞的血漿以及種蛋中是否有ALV感染來實施凈化，而常常忽略了對公雞的檢測，然而對于凈化中公雞檢測究竟以血漿病毒分離為準還是以精液分離為準也無明確結(jié)論

2、。另外，ALV經(jīng)垂直傳播感染后，會引起感染雞體重、產(chǎn)蛋率等各種生產(chǎn)機能下降，也會導致很高的致死率，給雞群造成很大的危害，對于一些高陽性率的地方品系雞群還存在過度淘汰影響育種進度的現(xiàn)實問題，我們希望通過多種途徑能夠降低高陽性率雞群的ALV帶毒率或至少減少由于垂直傳播帶毒對雛雞的致病作用，為此本研究通過雞胚卵黃囊接種模擬雛雞感染ALV，然后給感染雛雞添加AZT等逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑類藥物觀察了此類藥物對降低ALV垂直傳播危害的作用。
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3、．不同種雞群禽白血病凈化中的種公雞檢測
　　本研究對我國兩個正在實施禽白血病凈化的種雞場的公雞分別采取血漿病毒分離和精液病毒分離兩種方式觀察和比較了兩種檢測途徑對評價種公雞ALV感染狀態(tài)時的對應性，并對部分陽性毒株做了序列測定和分析。結(jié)果顯示，對正在實施凈化的某蛋雞場檢測公雞400份，其中精液樣品病毒分離陽性為11份，血漿樣品病毒分離陽性為13份，精液和血漿病毒分離同時為陽性的有8份。對正在實施凈化的某野山雞場檢測公雞1800份，

4、其中精液樣品病毒分離陽性為45份，血漿樣品病毒分離陽性為188份，精液和血漿病毒分離同時為陽性的僅有16份。上述數(shù)據(jù)說明僅僅通過單純的血漿病毒分離或者單純的精液病毒分離均不能有效的檢出所有的ALV陽性公雞，從凈化效率角度考慮應該同時對公雞的血漿和精液做全面的病毒分離來確定陽性個體進而淘汰，這將有助于在最短的時間內(nèi)淘汰陽性公雞。對部分毒株gp85序列的測定和同源性分析結(jié)果顯示，所分離到的20個毒株之間同源性高達99.0％~100%，這些樣

5、品與A亞群參考株之間的同源性最高，為88.6%~99.2%，顯著高于與B、E、F、J、K亞群的同源性，與B、E、F、J、K等不同亞群同源性分別為83.2%~83.7%、85.4%~89.6%、83.0%~83.9%、50.0%~51.1%和84.8%~85.9%。進化樹比對分析也發(fā)現(xiàn)，分離到的所有毒株均與A亞群毒株在一個分支上。
　　2．逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑類藥物對垂直傳播感染ALV的SPF雞的保護作用
　　本研究通過對SPF雞胚

6、卵黃囊接種NX0101毒株模擬雞胚經(jīng)垂直傳播感染ALV-J，待雞胚孵育出殼后，將雞胚分為兩組，只對其中一組在出殼后的連續(xù)一周內(nèi)肌肉注射5mg的Zidovudine（AZT）和2mg的Lamivudine（LAM），另一組在出殼后的連續(xù)一周內(nèi)肌肉注射等劑量的生理鹽水，與卵黃囊接種空白DMEM并且出殼后連續(xù)一周內(nèi)肌肉注射等劑量生理鹽水的完全空白對照組對比，觀察逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑類藥物對SPF雞的保護作用以及對降低垂直傳播危害的作用。結(jié)果顯示，未