日本對蝦肝胰腺及血細胞的培養(yǎng).pdf

1、該文研究了日本對蝦肝胰腺和血細胞的培養(yǎng),并采用培養(yǎng)細胞的RNA/DNA值進行細胞生長狀況的評定.首先,在日本對蝦的肝胰腺和血細胞原代培養(yǎng)的基礎(chǔ)上,利用RNA/DNA值進行不同pH值培養(yǎng)基的比較,認為對于肝胰腺細胞pH7.6為最適值,對于血細胞pH7.2為最適值,同時利用光鏡及電鏡做了一些形態(tài)和結(jié)構(gòu)上的觀察,在電鏡下觀察到的日本對蝦血細胞為無顆粒狀細胞.其次,摸索了肝胰腺細胞的培養(yǎng)條件,實驗采用199培養(yǎng)基,并在其基礎(chǔ)上添加胎牛血清、Na

2、Cl、CaCl<,2>、MgCl<,2>、NaHCO<,3>、葡萄糖和其它無機離子,滲透壓用NaCl等調(diào)節(jié),分別在三種pH值、三種滲透壓和三種Zn<'2+>濃度下,原代培養(yǎng)日本對蝦肝胰腺細胞,并以RNA與DNA的比值為指標評定其生長狀況.結(jié)果為日本對蝦肝胰腺細胞在pH7.6、滲透壓為730mmol/Kg和Zn<'2+>濃度為80μg/L時,生長最好.然后,探討了金屬離子對培養(yǎng)日本對蝦肝胰腺細胞的影響,在培養(yǎng)基中加入Ca<'2+>、Mg<

3、'2+>、Ca<'2+>+Mg<'2+>和Zn<'2+>,以測定細胞的RNA/DNA值作為評價指標,結(jié)果表明,加入適量金屬離子可促進細胞生長,各組細胞的RNA/DNA值均高于對照組,培養(yǎng)基中混合加入Ca<'2+>和Mg<'2+>有助于細胞貼壁生長.最后,實驗在199培養(yǎng)基中加入促進細胞生長的亞油酸,對日本對蝦肝胰腺細胞進行傳代培養(yǎng),測定傳代細胞的總磷和無機磷含量,當亞油酸的加入量為16×10<'-5>M時,細胞的總磷和有機磷含量均為最高