肉雞氣管阻塞的發(fā)病機(jī)理研究.pdf

1、肉雞氣管阻塞是我國(guó)北方地區(qū)近年來廣泛發(fā)生的一種嚴(yán)重的綜合性、流行性呼吸道疾病，在不同規(guī)模、不同品種、不同養(yǎng)殖方式的養(yǎng)殖場(chǎng)皆有發(fā)生。該病發(fā)病速度快，治療困難，死亡率高，給廣大養(yǎng)殖戶帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。為了更深入的了解肉雞氣管阻塞的癥狀及發(fā)病機(jī)理，本研究利用病理組織學(xué)、生物化學(xué)、藥敏試驗(yàn)以及第二代Miseq高通量測(cè)序等方法，對(duì)山東聊城地區(qū)肉雞養(yǎng)殖場(chǎng)中氣管阻塞病例進(jìn)行病理組織學(xué)的觀察、病原體的分離鑒定、病原細(xì)菌藥敏試驗(yàn)以及發(fā)病肉雞呼吸系統(tǒng)內(nèi)

2、細(xì)菌和真菌微生物多樣性及其相關(guān)性進(jìn)行研究，為臨床上肉雞氣管阻塞疾病的防治提供理論依據(jù)。
　　病理組織學(xué)觀察。采取臨床上自然發(fā)病肉雞的肺臟和氣管，進(jìn)行常規(guī)石蠟切片、H.E.染色和改良PTAH染色，利用剖檢和病理組織學(xué)方法觀察其病理變化，為肉雞氣管阻塞發(fā)病機(jī)制研究和臨床防控提供理論依據(jù)。結(jié)果顯示，氣管阻塞發(fā)病肉雞的氣管環(huán)充血、出血，氣管、支氣管內(nèi)有黃白色干酪樣阻塞物，阻塞多發(fā)生在支氣管與肺臟連接處。氣管黏膜充血、出血，并有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)

3、，上皮細(xì)胞嚴(yán)重脫落；肺臟出血、淤血明顯；肺臟細(xì)支氣管阻塞，阻塞物主要為脫落的上皮細(xì)胞、血細(xì)胞以及滲出的纖維和蛋白。說明發(fā)病雞出現(xiàn)了較嚴(yán)重的組織損傷，并伴有炎性反應(yīng)。
　　病原體的分離鑒定。無(wú)菌采集患有典型氣管阻塞癥狀的病死肉雞肺臟，采用培養(yǎng)特性、生化試驗(yàn)等方法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行分離鑒定，以及對(duì)分離菌株進(jìn)行藥敏試驗(yàn)；同時(shí)采用雞胚接種、血凝和血凝抑制試驗(yàn)以及分子生物學(xué)方法進(jìn)行病毒的分離鑒定，研究肉雞氣管阻塞疾病的部分致病因素。結(jié)果顯示，從10

4、份病例中均分離到大腸桿菌和金黃色葡萄球菌，分離菌株對(duì)常用抗生素均表現(xiàn)出不同程度的耐藥性，且呈嚴(yán)重的多重耐藥現(xiàn)象；H9N2 AIV和NDV的分離率分別為80％和30%，兩者共感染率為30%。表明肉雞氣管阻塞疾病是由多種病原體聯(lián)合導(dǎo)致，且混合感染嚴(yán)重。
　　細(xì)菌多樣性分析。采用第二代Miseq高通量測(cè)序方法對(duì)發(fā)病與健康雞只的肺臟和氣管內(nèi)微生物進(jìn)行檢測(cè)，并分析各樣品中菌種類別、群落組成、不同樣品之間物種差異以及與疾病發(fā)生的關(guān)系。結(jié)果顯示

5、，在肺臟和氣管內(nèi)共檢測(cè)到270種細(xì)菌，隸屬13門、23綱、39目、74科、140屬。病例氣管中細(xì)菌數(shù)比肺臟高，同時(shí)也比健康氣管略有增多，而多數(shù)病例肺臟內(nèi)細(xì)菌數(shù)比健康肺臟少。結(jié)果表明，不同樣品之間存在一定的物種差異，地域?qū)悠分屑?xì)菌組成影響較大，引發(fā)肉雞氣管阻塞的細(xì)菌病原體也存有不同，主要有支原體、大腸桿菌、志賀氏菌、里氏桿菌、棒狀桿菌、葡萄球菌、鳥桿菌和腸球菌等；此外，所占比例較大的乳酸球菌和乳酸桿菌是益生菌。
　　真菌多樣性分析