白菜核不育兩用系基因組AFLP差異片段篩選、克隆及序列分析.pdf

1、該研究以'矮腳黃'白菜核不育兩用系的測交后代群體為實驗材料,利用AFLP指紋圖譜技術(shù)研究了可育系與不育系基因組DNA多態(tài)性差異,并對差異條帶進行了克隆、測序.探討了所得差異片段與先前所得的育性相關(guān)基因之間的關(guān)系.結(jié)果如下:(1)該實驗分別以可育系和不育系基因組DNA混合池為模板,選用64對E+3/M3-引物組合進行選擴篩選,分析得到了兩條可育系所特有的差異條帶MF-14和MF-24.(2)以回收得到特異片段MF-14為探針,通過Sout

2、hern雜交檢測到白菜不育系中也含有該片段的同源序列.并初步探討不育系堿基序列突變情況.(3)序列測定表明特異片段MF-14長289bp;比較特異片段MF-14與先前所得育性相關(guān)片段S107及育性相關(guān)基因CYP86MF、BCMF1、BCMF2、BCMF3、BCMF4之間序列關(guān)系,結(jié)果顯示它們之間的相似性均小于50﹪.分析結(jié)果表明MF-14是可育系中發(fā)現(xiàn)的一個新的特異片段.(4)以MF-14特異片段為基礎(chǔ),設(shè)計引物進行了SCAR標記轉(zhuǎn)換研