16912.鹽脅迫下甜菜蛋白質(zhì)含量測定及特異蛋白的分離與鑒定

1、中文摘要鹽脅迫是影響植物生長發(fā)育的主要環(huán)境因子之一。甜菜耐鹽性強主要表現(xiàn)在它比其它作物有更強的吸收或容納Na十的能力。蛋白質(zhì)是生物體行使其生理功能的基本單位，也是生命代謝活動的直接體現(xiàn)者，對其功能進行分析和鑒定將會對闡明基因的功能起到推動作用，并且能夠更加客觀準確的揭示生命現(xiàn)象。本研究以耐鹽型T510品系和鹽敏感型210品系甜菜為研究對象，通過對甜菜葉片總蛋白提取方式及電泳條件的優(yōu)化，最終可獲得高分辨率、重復性好的耐鹽型T510品系和鹽

2、敏感型210品系的2一DE圖譜。通過軟件分別將兩個品系的280mmol／LNaCl溶液處理組與對照組進行對比，T510中可匹配的蛋白點共607個，210中共有317個。通過蛋白點表達量的計算，T5lO中有15個受鹽脅迫影響而變化顯著的蛋白質(zhì)點，在鹽脅迫處理中表達豐度減弱的蛋白質(zhì)點有8個，表達豐度增強的蛋白質(zhì)點有7個，其中有2個差異表達蛋白點鑒定出未知蛋白；在210品系中有12個受鹽脅迫影響而變化顯著的蛋白質(zhì)點，與對照組相比，在鹽脅迫處理

3、中表達豐度減弱的蛋白質(zhì)點有3個，表達豐度增強的蛋白質(zhì)點有9個，其中有1個差異表達蛋白點鑒定出未知蛋白，有2個差異表達蛋白點鑒定出2種蛋白(PO05)。對兩個品系鹽脅迫處理的雙向電泳圖譜進行分析，有288個點相匹配，3個差異點(210品系中點5和點13、T5lO品系中點11)。210品系中的點5在鹽脅迫處理中下調(diào)表達，相對應(yīng)的蛋白點在T510品系中上調(diào)表達；2lO品系中的點13在鹽脅迫處理中下調(diào)表達，在T510中缺失；T510品系的點11

4、在鹽脅迫處理中下調(diào)表達，相對應(yīng)的蛋白點在210品系鹽脅迫處理中上調(diào)表達。28個差異表達蛋白點經(jīng)扣取、膠內(nèi)酶解、MALDITOF／TOF質(zhì)譜鑒定后，1個點未被成功鑒定(210品系，點13)，其余27個點均被成功鑒定。關(guān)鍵詞：甜菜；鹽脅迫；特異蛋自l●AbstractsaltStressis。ne。ftheenvir。mr。mentalfact。rsthathaveaninnuence。nthe野。wchanddevel。pmentofpl

5、amsThatthebeethasstr。ngsalttoleranceisrenectedinthattllebeethasS仃ongerabilitytoabsorborh01dNathanotherplan‘s。ProteinisthebasicunitthatorganismmakesitsphysiologicalfunctionworkAnditembodvsthemetabolicactivitiesof1ifedrect

6、lyToanalyzeandappraiseltsfunctloncangiveagreatpuShtoclarifythegenefunctionandcanreVeal1ifephenomenonmoreobjectivelyandaccuratelyInthisstudy，salt—resiStingT51Ostrainsandsalt—sensitiVe21Ostrainsofbeetasthemainsubject，byopt

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8、oupwithcontrol鏟oup，也ereare607proteinspotst11atmatchT510and317for210Bythecalculationoftheprotemspots，thereare15proteinspotsintheT51Ochangedbecausetheyarea虢ctedbysalts仃ess，8proteinSpotsofexpreSSabundanceint11esalts扛esstrea

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10、etheyarea舵ctedbysaltstressComparedwith也econtrol伊oup，3proteinSpotSoteXpressabundallcein也esaltstresstreatmentsareweakened，8areStrengthened，onedi目[色rentiallyexpressedproteinspotsofthemidentifiedasunknownproteln，“Vodiffer苫nt

11、iallyexpressedproteinspotsofthemidenti矗edtwotypesofprotein口O05)Bvanalysisingt11e鉚odimensionalgelelectrophoresisoft、ⅣoStrainsofsaltStress，wefind288proteinspotscanbematchedand3can’t(points5and13in210Strains，p0Int11㈨4㈣5吣4㈣2