16070.氧化葡萄糖酸桿菌的固定化及其活性評價的研究

1、分類號：Q8142密級：UDC：華東理工大學(xué)學(xué)位論文氧化葡萄糖酸桿菌的固定化及其活性評價的研究王存勛指導(dǎo)教師姓名：任宇紅教授華東理工大學(xué)生物工程學(xué)院申請學(xué)位級別：碩士論文定稿日期：20130109學(xué)位授予單位：專業(yè)名稱：藥學(xué)論文答辯日期：20130222華東理工大學(xué)學(xué)位授予日期：2Q13霉11曼1毫囂答辯委員會主席：葉邦策評閱人：沈亞領(lǐng)蘇二正華東理工大學(xué)碩士學(xué)位論文第1頁氧化葡萄糖酸桿菌的固定化及活性評價的研究摘要氧化葡萄糖酸桿菌(a材

2、cD玎D6口c冊D砂婦瑚)由于其細(xì)胞內(nèi)與膜上含有豐富的氧化還原酶并且結(jié)合自身不完全氧化的特征成為生物工業(yè)中廣泛使用的微生物。本文利用大孔樹脂、硅藻土、殼聚糖及其衍生物Catech01殼聚糖作為固定化載體材料進(jìn)行G似脅的固定化并對其活性評價，通過對固定化材料的選擇和固定化方法的優(yōu)化來達(dá)到最佳的固定化效果。第1部分：利用大孔樹脂和硅藻土，并對大孔樹脂與硅藻土進(jìn)行多巴胺修飾，殼聚糖及Catcch01殼聚糖作為載體進(jìn)行氧化葡萄糖酸桿菌的固定化。

3、固定化后，大孔樹脂與多巴胺修飾的大孔樹脂固定化率分別為62％和83％；活力回收率為66％，68％，硅藻土與多巴胺修飾的硅藻土固定化率為8l％和84％，活力回收率65％和61％，殼聚糖與戊二醛交聯(lián)及Catech01殼聚糖的固定化率為100％和64％，活力回收率52％和76％。大孔樹脂，硅藻土固定化G嬲咖后，菌體與材料的結(jié)合力比較弱，菌體容易脫落，在200印m的搖床上振搖35小時后菌體殘留量為50％左右。在固定化細(xì)胞的重復(fù)利用上重點(diǎn)研究了C

4、atech01殼聚糖與利用戊二醛和殼聚糖進(jìn)行交聯(lián)這兩種方法，經(jīng)過6批次反應(yīng)后相對細(xì)胞活性分別為58％和49％。第2部分：利用殼聚糖作為載體材料，戊二醛為交聯(lián)劑，碳酸氫鈉作為致孔劑進(jìn)行G甜塒a，zs的固定化并研究其活性優(yōu)化固定化條件：殼聚糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15％，戊二醛的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為O5％，碳酸氫鈉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10％，產(chǎn)物利用HPLC進(jìn)行測定。通過對條件的優(yōu)化，固定化率達(dá)到100％，活力回收率達(dá)到92％。最優(yōu)的溫度和pH分別為30℃和60。在重