不同發(fā)育時間蓖麻種子中脂肪酸含量測定和MSAP與cDNA-AFLP分析.pdf

1、蓖麻(Ricinus conununis L.)為雙子葉植物，世界十大油料作物之一。蓖麻油主要由蓖麻油酸等成分組成。2129是通遼地區(qū)蓖麻育種重要父本材料。甲基化敏感擴增多態(tài)性(MSAP)技術(shù)、cDNA-AFLP技術(shù)成功用于研究基因表達遺傳機理、功能標(biāo)記分析等。
　　本研究以2129品系為研究對象，測定不同發(fā)育時間百粒蓖麻鮮種子中各種脂肪酸絕對含量;采用MSAP和cDNA-AFLP技術(shù)，研究不同發(fā)育時間蓖麻種子中脂肪酸含量差異基因

2、的表達，篩選差異條帶，對其進行測序、功能注釋，以期為蓖麻高油品質(zhì)育種研究奠定基礎(chǔ)。本試驗主要研究結(jié)果如下:
　　1.完成2129的6個不同發(fā)育時間蓖麻種子中粗脂肪和粗脂肪中各種脂肪酸（即蓖麻油酸、亞油酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、亞麻酸、花生一烯酸）絕對含量的測定;
　　2.MSAP技術(shù)體系分析2129不同發(fā)育時間種子中差異基因的甲基化水平。選用32對引物組合，對6個不同發(fā)育時間蓖麻種子進行差異基因擴增，共獲得647條明顯差異

3、表達的條帶，經(jīng)NCBI同源性檢索，37條差異基因與已知序列同源性較高。同源基因所表達的蛋白包括8大類，其中FAD氧化還原酶(B02)、ATP結(jié)合與轉(zhuǎn)運酶(195)、α-半乳糖苷酶/α-正乙酰氨基轉(zhuǎn)移酶(D16)、過氧化物酶(F13)與脂肪酸的合成、運輸有直接或間接的關(guān)系。
　　3.cDNA-AFLP技術(shù)體系對2129不同發(fā)育時間種子差異基因進行分離分析。62對特異引物組合用于差異基因擴增，得到534條差異基因，26條序列經(jīng)NCBI