15724.小鼠胚胎干細胞干性維持關(guān)鍵蛋白質(zhì)的鑒定與初步研究

1、中圖分類號墼墨UDC570碩士學位論文學校代碼!Q墨塑密級公玨小鼠胚胎干細胞干性維持關(guān)鍵蛋白質(zhì)的鑒定與初步研究Identificationofkeyregulatorsmaintainingstemnessofmurineemb巧onicstemcells作者姓名：學科專業(yè)：研究方向：學院(系、所)：指導教師：副指導教師：劉朝山生物學細胞生物學生命科學院張學敏研究員李濤副研究員論文答辯日期壟!三：』：12答辯委員會主席中南大學二O一三年

2、五月碩士學位論文摘要小鼠胚胎千細胞干性維持關(guān)鍵蛋白質(zhì)的鑒定與初步研究摘要：胚胎干細胞(emb巧onicstemcells，ESC)是一種具有無限增殖能力和無限分化潛能的多能性細胞，它幾乎能分化成機體組織中所有類型的細胞。胚胎干細胞的成功分離、培養(yǎng)和定向分化體系的建立為細胞工程帶來了希望。關(guān)于胚胎干細胞分化調(diào)控的研究，使我們得以深入認識生命的發(fā)育和進化等過程。胚胎干細胞作為一種極其特殊的多能性細胞，人們將其維持未分化狀態(tài)和多向分化潛能的能

3、力稱之為“干性”。關(guān)于胚胎干細胞干性的維持一直是細胞生物學領(lǐng)域的一個前沿熱點問題。2012年，來自英國的發(fā)育生物學家約翰格登和日本京都大學的山中申彌因在細胞核重新編程研究領(lǐng)域的杰出貢獻而獲得諾貝爾生理學或醫(yī)學獎。他們的研究成果揭示了轉(zhuǎn)錄因子0ct4、Sox2、Klf4和cmyc是胚胎干細胞維持干性的關(guān)鍵調(diào)控蛋白質(zhì)。然而，胚胎干細胞干性維持是一個高度復雜且被精密調(diào)控的生理過程，其詳細機制仍不清楚。為深入研究胚胎干細胞的干性維持機制，挖掘其

4、關(guān)鍵功能蛋白質(zhì)，我們開展了本研究。由于小鼠胚胎干細胞具有易于培養(yǎng)、生長較快、體系成熟等優(yōu)點，我們選定小鼠胚胎干細胞為模型，提出鑒定胚胎干細胞分化最早期的細胞蛋白質(zhì)組變化，從中尋找維持小鼠干細胞干性的關(guān)鍵蛋白質(zhì)。白血病抑制因子(LⅢ)是小鼠胚胎干細胞體外培養(yǎng)抑制分化的主要添加因子，通過在培養(yǎng)體系中撤除LIF、飼養(yǎng)層細胞(feedercells)、和血清誘導其分化，7小時后細胞開始貼壁并發(fā)生形態(tài)變化，我們將這一時間點作為界定細胞開始早期分化