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1、分類號：Q9533單位代碼：10114密級：學(xué)號：201010056pcDNA3.1PDGFGALpcDNA3.1PDGFGALpcDNA3.1PDGFGALpcDNA3.1PDGFGAL在在在在Neuro2aNeuro2aNeuro2aNeuro2a細胞的表達細胞的表達細胞的表達細胞的表達及其對細胞增殖和周期的影響及其對細胞增殖和周期的影響及其對細胞增殖和周期的影響及其對細胞增殖和周期的影響研究生：榮曼指導(dǎo)教師：劉田福教授學(xué)位類型：科
2、學(xué)學(xué)位專業(yè)名稱：動物學(xué)研究方向：人類疾病模型所在學(xué)院：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院二○一三年三月山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3目錄中文摘要中文摘要..............................................................................................................................................................
3、............................................................................................................................................................................................................................
4、..............................................................................................................................................................................................................1111ABSTRACTAB
5、STRACTABSTRACTABSTRACT......................................................................................................................................................................................................
6、............................................................................................................................................................................................................................
7、..............................................................................................................................................3333插圖、附表清單插圖、附表清單............................................................
8、............................................................................................................................................................................................................................
9、............................................................................................................................................................................................................................
10、....................................5555主要符號中英文對照表主要符號中英文對照表................................................................................................................................................................
11、............................................................................................................................................................................................................................
12、............................................................................................................6666前言..........................................................................................................
13、......................................7材料和方法..........................................................................................................................................91實驗材料................................
14、..........................................................................................................91.1細胞：...........................................................................................................
15、...............................91.3主要試劑......................................................................................................................................91.4主要儀器.......................................
16、..............................................................................................121.5主要試劑配制...................................................................................................................
17、.........132實驗方法........................................................................................................................................182.1目的片段PDGFGAL的擴增.................................................
18、.................................................182.2重組質(zhì)粒PMDTPDGFGAL的構(gòu)建及鑒定...........................................................................192.3重組表達質(zhì)粒PCDNA3.1PDGFGAL的構(gòu)建.........................................
19、................................232.4NEURO2A細胞的常規(guī)培養(yǎng)......................................................................................................252.5細胞生長曲線的繪制（MTT法）...............................................
20、............................................262.6PCDNA3.1PDGFGAL瞬時轉(zhuǎn)染NEURO2A(LIPFECTAMIM2000轉(zhuǎn)染試劑)...................262.7建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染小鼠PDGFGAL的NEURO2A細胞系：........................................................272.8細胞轉(zhuǎn)錄水平的鑒定（包括
21、瞬時轉(zhuǎn)染后和穩(wěn)轉(zhuǎn)單克隆細胞）...........................................282.9轉(zhuǎn)染后GAL蛋白水平的測定..................................................................................................312.10內(nèi)源性過表達GAL對NEURO2A細胞的增殖分析.................
22、............................................362.11內(nèi)源性過表達GAL對NEURO2A細胞周期的分析.............................................................362.12統(tǒng)計學(xué)處理..........................................................................
23、....................................................37結(jié)果..............................................................................................................................................381重組質(zhì)粒PMDTPDGFGAL的鑒定.
24、..........................................................................................382重組表達質(zhì)粒PCDNAPDGFGAL的鑒定.................................................................................383NEURO2A細胞生長曲線的繪制......
25、............................................................................................394脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染后GAL轉(zhuǎn)錄水平的鑒定.......................................................................................404.1瞬時轉(zhuǎn)染后不同時間段GAL轉(zhuǎn)錄水
26、平測定...........................................................................404.2穩(wěn)轉(zhuǎn)后不同細胞克隆中轉(zhuǎn)錄水平的鑒定................................................................................415脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染后GAL蛋白表達水平的鑒定..................
27、.............................................................425.1瞬時轉(zhuǎn)染后不同時間GAL表達水平......................................................................................425.2細胞克隆中GAL表達水平的鑒定................................
28、..........................................................436內(nèi)源性過表達GAL對NEURO2A細胞的增殖分析...................................................................437內(nèi)源性過表達GAL對NEURO2A細胞周期分析..........................................
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