RhoBTB3在腎透明細胞癌中的表達及對腎癌細胞增殖、周期和凋亡的影響.pdf

1、目的:RhoBTB家族屬于RhoGTP酶大家族的一員,與其他典型的Rho家族成員在控制細胞形態(tài)、調控細胞增殖、黏附、遷移和膜運輸等明確的作用不同,RhoBTB亞族的功能雖然未能完全明確,但是一些研究已經證實RhoBTB蛋白在致瘤過程中是通過降低或消除了某些基因的功能,從而引起蛋白功能失調導致細胞穩(wěn)態(tài)的改變。RhoBTB的研究不僅有利于深入對Rho家族的了解,而且更有助于揭示腫瘤的發(fā)病機制和腫瘤靶向藥物的研發(fā)。本課題旨在從分子,細胞,臨床

2、病例三個層面初步探索RhoBTB3在腎透明細胞癌中的生物學效應。
　　方法:通過定量RT-PCR方法,免疫組化以及Western印跡(Western blot法)檢測RhoBTB3在腎細胞癌和癌旁組織,以及腎透明細胞癌細胞系和正常腎小管上皮細胞系的表達情況。構建 pLVX-IRES-Neo-RhoBTB3和pLVX-IRES-ZsGreen-RhoBTB3慢病毒載體,包裝成慢病毒后感染786-o和HKC細胞系。 MTS方法檢測過表

3、達和敲除腎透明細胞癌細胞系中RhoBTB3后的生長曲線,通過劃痕試驗和Transwell法測RhoBTB3對腎透明細胞癌的細胞侵襲和遷移的影響。通過流式細胞儀測RhoBTB3過表達和敲除后對腎透明細胞癌細胞周期和凋亡的影響。
　　結果: RT-PCR,免疫組化以及Western印跡法顯示RhoBTB3在腎透明細胞癌組織和細胞株中表達水平明顯低于相應的癌旁組織及正常腎小管上皮細胞系(HKC)(P值均<0.05),過表達RhoBTB3