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文檔簡介
1、本研究用標準AIV H9N2亞型毒株接種SPF雞胚，收獲尿囊液。經(jīng)過差速離心，進行蔗糖密度梯度超速離心。根據(jù)流感病毒的浮密度(g/cm3)范圍(1.19～1.25)，確定蔗糖的密度梯度為30～60﹪。根據(jù)AIV的直徑范圍(80～120nm，平均為100nm)，確定離心轉(zhuǎn)速為30000r/min，離心時間3h。再經(jīng)過透析后，用分光光度法測定其病毒含量為1.638mg/mL。本研究采用兔抗AIV血清IgG作為包被抗原，以間接ELISA法檢測
2、雜交瘤細胞培養(yǎng)上清液，篩選到分泌抗雞和兔共有獨特型表位抗體的融合細胞，從而獲得分泌目的單克隆抗體的雜交瘤細胞系。經(jīng)過預試驗，表明最適抗原包被量為102μg/mL。采用間接ELISA檢測法，篩選獲得3株(2E6H1、2E6G4、3E3D7)分泌特異性單克隆抗體的雜交瘤細胞。3株融合細胞培養(yǎng)上清液中的單克隆抗體效價均為2-4，小鼠腹水中的單抗效價是1：3200。經(jīng)檢測表明，三株細胞系產(chǎn)生的單克隆抗體僅與相應的雞抗H9N2亞型AIV血清發(fā)生特
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