96-Ⅱ喜樹組織培養(yǎng)及其轉(zhuǎn)CMO基因遺傳轉(zhuǎn)化的研究.pdf

1、本文對(duì)引入的新品種96-Ⅱ喜樹進(jìn)行腋芽增殖和愈傷組織再生途徑的再生體系建立，并對(duì)所獲得組培苗定植后與實(shí)生苗進(jìn)行了對(duì)比研究。在此基礎(chǔ)上，利用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法將抗旱基因——膽堿單加氧酶基因(CMO)轉(zhuǎn)入到96-Ⅱ喜樹體內(nèi)，通過(guò)目的基因的表達(dá)提高喜樹的抗旱性，解決96-Ⅱ喜樹擴(kuò)大栽種范圍及適應(yīng)現(xiàn)有環(huán)境旱化等問(wèn)題。本文主要研究結(jié)果如下： 1、從腋芽建立初始培養(yǎng)，研究各階段影響再生諸因素的作用，建立起96-Ⅱ喜樹腋芽增殖和愈傷組織再生

2、兩種途徑的組培系統(tǒng)。愈傷組織誘導(dǎo)率達(dá)95％以上，分化率達(dá)90％以上，生根率達(dá)94％以上，移栽成活率達(dá)95％以上。 2、96-Ⅱ喜樹組培再生苗移栽成活率高，移栽30天左右，完全適應(yīng)了外界環(huán)境后與具四片真葉的實(shí)生苗對(duì)比，結(jié)果表明96-Ⅱ喜樹組培苗能較快適應(yīng)環(huán)境。同四川金堂產(chǎn)地的喜樹實(shí)生苗相比，在生長(zhǎng)速率、光合能力、喜樹堿含量等方面表現(xiàn)出一定優(yōu)勢(shì)。 3、通過(guò)根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)，建立了高效的96-Ⅱ喜樹遺傳轉(zhuǎn)化體系：卡那霉素濃度20