喜樹中喜樹堿積累規(guī)律及組織培養(yǎng)的初步研究.pdf

1、本文以喜樹為材料，就以下方面進(jìn)行了研究：通過組織培養(yǎng)技術(shù)，成功地對其進(jìn)行了喜樹愈傷組織的誘導(dǎo)與繼代；比較分析了我國十三個(gè)省區(qū)喜樹果實(shí)中喜樹堿(CPT)和10-羥基喜樹堿(HCPT)含量變化規(guī)律；研究了喜樹幼枝發(fā)育過程中各組織結(jié)構(gòu)變化特別是分泌結(jié)構(gòu)的變化，確定CPT在營養(yǎng)器官中的積累部位和分布規(guī)律。主要結(jié)果如下： 1.選取喜樹各部分作為外植體進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)，以芽、幼葉、幼莖為佳，尤以幼莖最佳。選取了BDS，MS兩種基本培養(yǎng)基對

2、外植體進(jìn)行誘導(dǎo)，發(fā)現(xiàn)基本培養(yǎng)基對愈傷組織誘導(dǎo)率的影響不顯著，但對其生長的影響較為顯著，BDS基本培養(yǎng)基更有利于愈傷組織的生長。將NAA、2,4-D、6-BA、KT等生長調(diào)節(jié)物質(zhì)分別附加在BDS基本培養(yǎng)基中進(jìn)行單因子實(shí)驗(yàn)，愈傷組織白色、干燥、致密。選取NAA、2,4-D、6-BA、KT等4種生長調(diào)節(jié)物質(zhì)以不同組合及濃度配比附加在BDS基本培養(yǎng)基中，結(jié)果表明，激素組合比單激素更能有效地誘導(dǎo)出愈傷組織，其中以BDS+2,4-D1.0mg/L+

3、KT0.6mg/L，BDS+2,4-D1.5mg/L+KT0.6mg/L，BDS+2,4-D2.0mg/L+KT0.6mg/L的組合誘導(dǎo)效果最好，愈傷組織濕潤、疏松，呈淡黃色。不同組合因子對愈傷組織繼代培養(yǎng)的效應(yīng)結(jié)果表明，BDS+2,4-D0.5mg/L+KT0.6mg/L是最佳的繼代配方，其次為BDS+BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L，BDS+NAA3.0mg/L+KT0.6mg/L，愈傷組織濕潤、疏松，長勢良好。 2

4、.高效液相色譜法測定了采自于我國十三個(gè)省區(qū)喜樹果實(shí)中喜樹堿和10-羥基喜樹堿的含量，發(fā)現(xiàn)福建的喜樹果實(shí)中喜樹堿含量最高，貴州的喜樹果實(shí)中喜樹堿含量最低，且差異極顯著(P＜0.01)。四川的喜樹果實(shí)中10-羥基喜樹堿含量最高，貴州的喜樹果實(shí)中10-羥基喜樹堿含量最低，且差異極顯著(P＜0.01)。分析同一省份(浙江)不同地區(qū)(杭州、金華、磐安)的喜樹果實(shí)中喜樹堿及10-羥基喜樹堿含量發(fā)現(xiàn)，三者含量差異不顯著。比較分析新鮮喜樹果實(shí)與放置一年

5、喜樹果實(shí)中喜樹堿及10-羥基喜樹堿含量，一些產(chǎn)地的含量有差異，一些沒有差異。分析喜樹果實(shí)(果皮和種子)中喜樹堿和10-羥基喜樹堿的含量，發(fā)現(xiàn)喜樹堿主要存在于喜樹種子中，而10-羥基喜樹堿在喜樹果皮和種子中的含量相當(dāng)。 3.對喜樹幼枝發(fā)育過程中各組織結(jié)構(gòu)變化的觀察和喜樹堿含量的分析，以及熒光顯微技術(shù)對喜樹堿的定位研究，結(jié)果表明，幼莖和幼葉表面的單細(xì)胞腺毛和幼莖及幼葉內(nèi)部由1-2層細(xì)胞包圍而成的分泌道是喜樹堿的主要積累部位，且隨著莖