羅氏沼蝦胸神經(jīng)節(jié)性腺刺激激素的分離純化與卵黃磷蛋白研究.pdf

1、　　本論文以羅氏沼蝦(Macrobrachiumrosenbergii)為研究對象，運(yùn)用凝膠過濾層析和HPLC技術(shù)對卵巢成熟的羅氏沼蝦胸神經(jīng)節(jié)所含蛋白進(jìn)行了分離純化和活性研究，同時還與卵巢未成熟的羅氏沼蝦腦和胸神經(jīng)節(jié)所含蛋白進(jìn)行了比較；運(yùn)用免疫沉淀法對羅氏沼蝦不同發(fā)育期的卵巢和卵巢不同部位的蛋白濃度進(jìn)行了研究；通過凝膠過濾和離子交換層析，初步分離純化了斑節(jié)對蝦(Penaeusmonodon)的卵黃磷蛋白(Vitellin，Vn)，并利用

2、已制備的羅氏沼蝦Vn抗體對其進(jìn)行了免疫學(xué)檢測?！　⊥ㄟ^免疫沉淀法對羅氏沼蝦不同發(fā)育期卵巢和卵巢不同部位的蛋白濃度關(guān)系進(jìn)行了研究，結(jié)果表明隨著卵巢發(fā)育期的發(fā)展，卵巢總蛋白和Vn都是不斷增加的，而且Vn占總蛋白的百分比與卵巢發(fā)育期是正相關(guān)的；對于卵巢的不同部位，中部比頭尾部含有更多的Vn，而且中部Vn所占總蛋白的比重也比頭尾部高。卵巢未成熟的羅氏沼蝦胸神經(jīng)節(jié)的凝膠過濾層析和HPLC分離圖譜與卵巢成熟的羅氏沼蝦胸神經(jīng)節(jié)存在較大的差別，卵巢未

3、成熟的胸神經(jīng)節(jié)的HPLC圖譜得到產(chǎn)物比卵巢成熟的少，而且在卵巢成熟的胸神經(jīng)節(jié)HPLC圖譜中出現(xiàn)的GSH活性蛋白峰在卵巢未成熟的胸神經(jīng)節(jié)HPLC圖譜中并沒有出現(xiàn)。而卵巢未成熟的羅氏沼蝦腦比胸神經(jīng)節(jié)的HPLC分離圖譜要復(fù)雜得多，說明腦里分泌的激素類物質(zhì)比胸神經(jīng)節(jié)多。通過Sepharose6B凝膠過濾和DEAE-SepharoseF.F離子交換層析，初步分離純化了斑節(jié)對蝦的Vn，經(jīng)過SDS-PAGE以及與羅氏沼蝦Vn抗體的免疫印跡可以發(fā)現(xiàn)，斑