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1、本文在已有研究的基礎(chǔ)上,綜合發(fā)育生物學(xué)和生殖營(yíng)養(yǎng)學(xué)的方法和技術(shù),輔以電鏡、生化、酶學(xué)等手段,系統(tǒng)研究胚胎期營(yíng)養(yǎng)與形態(tài)發(fā)生的相關(guān)性,并采用分子生物學(xué)技術(shù),檢測(cè)發(fā)育過(guò)程中器官的形成、發(fā)育及其執(zhí)行生理功能的情況,為甲殼動(dòng)物胚胎發(fā)育學(xué)研究積累基礎(chǔ)資料,同時(shí)為生產(chǎn)中提高羅氏沼蝦繁殖育成率提供理論支持。主要研究結(jié)果總結(jié)如下: 1羅氏沼蝦胚胎的附著機(jī)制的研究 采用組織學(xué)和掃描電鏡的方法研究了羅氏沼蝦胚胎的附著結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明,抱卵雌蝦腹
2、肢的原肢和內(nèi)肢上布滿(mǎn)腹肢粘液腺分泌的粘液;攜卵剛毛中空,壁厚,剛毛外壁由微絨毛狀結(jié)構(gòu),以利胚胎附著。胚胎外表面由初級(jí)卵膜和次級(jí)卵膜組成,次級(jí)卵膜主要由卵巢粘液腺分泌的粘液參與形成。 2羅氏沼蝦胚胎發(fā)育的形態(tài)學(xué)研究 采用組織切片、透射電鏡和掃描電鏡制片的方法,研究了羅氏沼蝦胚胎發(fā)育過(guò)程中卵黃和組織器官的形態(tài)發(fā)生。結(jié)果顯示:羅氏沼蝦的胚胎發(fā)育,基本上是靠卵黃為整個(gè)發(fā)育過(guò)程提供物質(zhì)和能量。剛產(chǎn)出的受精卵內(nèi),卵黃顆粒分布均勻且排
3、列緊密,卵黃顆粒內(nèi)部中心區(qū)致密,外周有許多分泌孔。隨著胚胎的發(fā)育,位于中部的卵黃顆粒首先釋放卵黃物質(zhì),為胚胎發(fā)育提供物質(zhì)和能量,然后周?chē)穆腰S顆粒也隨之不斷釋放卵黃物質(zhì)。 3胚胎發(fā)育過(guò)程中主要營(yíng)養(yǎng)素的研究 采用生物化學(xué)方法測(cè)定了羅氏沼蝦胚胎發(fā)育各時(shí)期的蛋白質(zhì)、脂類(lèi)和糖類(lèi)含量和氨基酸、脂肪酸的組成。結(jié)果表明:蛋白質(zhì)、脂類(lèi)和糖類(lèi)是羅氏沼蝦胚胎的主要成分,它們的含量在胚胎發(fā)育各時(shí)期不同,體現(xiàn)了胚胎在不同時(shí)期形成不同組織器官的過(guò)
4、程中,利用卵黃物質(zhì)的不同速度和效率。 4胚胎發(fā)育過(guò)程期酶學(xué)研究 采用生物化學(xué)方法分別測(cè)定了羅氏沼蝦胚胎發(fā)育期主要消化酶:胃蛋白酶(Pepsin)、類(lèi)胰蛋白酶(Tryptase)、淀粉酶(Amylase)、纖維素酶(Cellulase)和脂肪酶(Lipase)的比活力,采用不連續(xù)垂直平板聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)定了六種同工酶:酯酶(EST)、蘋(píng)果酸脫氫酶(MDH)、谷氨酸脫氫酶(GDH)、堿性磷酸酶(ALP)、乳酸脫氫酶(LD
5、H)和淀粉酶(AMY)在成熟卵細(xì)胞和胚胎發(fā)育時(shí)期的表達(dá)特征。 5胚胎發(fā)育期復(fù)眼的形成及其蛻皮抑制激素的表達(dá)采用組織學(xué)方法顯示羅氏沼蝦胚胎發(fā)育時(shí)期復(fù)眼及眼柄的的形態(tài)發(fā)生過(guò)程,用RT-PCR方法檢測(cè)羅氏沼蝦胚胎發(fā)育各時(shí)期蛻皮抑制激素(MIH)mRNA的表達(dá)。 6羅氏沼蝦和日本沼蝦胚胎期可溶性蛋白的比較研究采用生物化學(xué)方法測(cè)定了羅氏沼蝦(Macrobrachiumrosenbergii)和日本沼蝦(Macrobrachiumj
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