腺病毒介導(dǎo)的hING4基因聯(lián)合持續(xù)低劑量率γ射線照射治療胰腺癌的體外實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、蘇州大學(xué)碩士學(xué)位論文腺病毒介導(dǎo)的hING4基因聯(lián)合持續(xù)低劑量率γ射線照射治療胰腺癌的體外實(shí)驗(yàn)研究姓名：田玥申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：影像醫(yī)學(xué)與核醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：蘇成海20080501。腺病毒介導(dǎo)的hlNG4基因聯(lián)合持續(xù)低劑量率Y射線照射治療胰腺癌的體外實(shí)驗(yàn)研究中文摘要AdhlNG4基因能在Pane1細(xì)胞中成功轉(zhuǎn)錄。(2)用AdhlNG4和AdGFP感染人胰腺癌細(xì)胞pane1，在倒置顯微鏡和熒光顯微鏡下觀察熒光表達(dá)情況及抑制細(xì)胞生長的作用在熒

2、光顯微鏡下觀察熒光表達(dá)，90％的細(xì)胞都表達(dá)GFP；AdhlNG4和AdGFP均呈現(xiàn)很高的感染效率：在熒光倒置顯微鏡下觀察AdhlNG4處理的Pane1細(xì)胞，出現(xiàn)明顯變圓、脫落、皺縮等病變，表明AdhlNG4對Pane1胰腺癌細(xì)胞具有明顯的抑制細(xì)胞生長的作用。(3)間接免疫熒光法檢測AdhlNG4在人胰腺癌細(xì)胞pane1中的表達(dá)AdhlNG4處理的Pane1細(xì)胞中有外源性ING4蛋白的表達(dá)。(4)MTT法檢測AdhlNG4和AdGFP對P

3、ane1細(xì)胞生長抑制經(jīng)AdhlNG4處理的pane1細(xì)胞生長明顯抑制，并呈現(xiàn)一定的劑量依賴性與時(shí)間依賴性。AdING4在50MOI劑量點(diǎn)時(shí)，pane1細(xì)胞出現(xiàn)較明顯的細(xì)胞抑制效應(yīng)，作用72h后，pane1細(xì)胞的抑制率為287％。(5)FACS檢測AdhING4對Pane1細(xì)胞生長抑制：Ad—hlNG4處理組可見明顯凋亡峰，50MOIAdhING4處理72h的Pane1細(xì)胞的凋亡率為242％。結(jié)論AdhING4能在胰腺癌Pane1細(xì)胞中成

4、功表達(dá)，并可在體外抑制其生長，誘導(dǎo)其凋亡。第二部分持續(xù)低劑量率y射線照射人胰腺癌Pane1細(xì)胞的體外實(shí)驗(yàn)研究目的125I粒子持續(xù)低劑量率Y射線體外照射胰腺癌Pane1細(xì)胞，研究粒子照射對腫瘤細(xì)胞的殺傷機(jī)制及其與劑量的關(guān)系，為臨床粒子治療提供依據(jù)。方法自制細(xì)胞照射裝置，采用125I粒子持續(xù)低劑量率丫射線照射胰腺癌細(xì)胞pane1：(1)照射后用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化；(2)克隆形成率檢測細(xì)胞增殖的改變；(3)流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡的