雙苯氟嗪-苯甲酸共晶的研究.pdf

1、雙苯氟嗪(Dipfluzine)是由河北醫(yī)科大學(xué)研制開(kāi)發(fā)的哌嗪類鈣拮抗劑，可以選擇性的擴(kuò)張腦血管，減少血栓形成，顯著降低腦水腫，改善和保護(hù)大鼠缺血性腦損傷，可明顯改善亞硝酸鈉引起的小鼠記憶障礙。
　　 藥物共晶是藥物有效成分(Activepharmaceuticalingredients，API)與共晶前體（Cocrystalformer，CCF）通過(guò)氫鍵等非共價(jià)鍵結(jié)合形成的復(fù)合物，具有改變藥物的溶解度、提高藥物的溶解度及溶出速

2、率、提高藥物的穩(wěn)定性及降低藥物的引濕性、提高藥物的生物利用度等優(yōu)點(diǎn)。
　　 目的:
　　 測(cè)定雙苯氟嗪的解離常數(shù)及油水分配系數(shù)，為制備藥物共晶提供理化參數(shù);以苯甲酸為CCF，制備雙苯氟嗪與苯甲酸的共晶，研究共晶形成的熱力學(xué)，并測(cè)定共晶的理化性質(zhì)如溶解度、溶出速率;測(cè)定藥物和共晶在大鼠血漿的藥代動(dòng)力學(xué)及各組織的組織分布;探索雙苯氟嗪共晶在改善API的理化性質(zhì)方面的潛力。
　　 方法:
　　 (1)采用電位滴

3、定法，以稀酸溶液為滴定劑，在不同體積比例的乙醇/水混合溶液中滴定不同濃度的雙苯氟嗪，得pKb1;再以pKb1對(duì)乙醇/水比例作圖，外推到乙醇為0時(shí)即為該濃度下純水中的解離常數(shù)pKb2，以pKb2對(duì)雙苯氟嗪濃度作圖得無(wú)限稀釋時(shí)的pKb，進(jìn)而求得pKa;以正辛醇-水為模擬系統(tǒng)，采用搖瓶法-紫外分光光度法測(cè)定不同油/水體積比例(1∶1、1∶3、1∶9)下的分配系數(shù)lgP
　　 (2)應(yīng)用溶劑輔助研磨法和超聲助溶法制備雙苯氟嗪和苯甲酸的共

4、晶，采用PXRD、DSC-TG、FT-IR、FT-Raman、ss-NMR、THz等技術(shù)手段對(duì)共晶的形成進(jìn)行表征;采用溶解度法，即測(cè)定不同濃度、不同溫度的苯甲酸溶液中雙苯氟嗪的溶解度，對(duì)共晶形成的結(jié)合常數(shù)和熱力學(xué)參數(shù)進(jìn)行測(cè)定;采用飽和溶解度法測(cè)定不同溫度下雙苯氟嗪及其共晶在水中的平衡溶解度。以藥典為依據(jù)，槳法測(cè)定了雙苯氟嗪及其共晶在pH=4.5的NaAc-HAc緩沖溶液中的溶出速率，考察藥物共晶的體外釋放度。
　　 (3)12只

5、SD雄性大鼠隨機(jī)分為兩組，分別以40mg/kg及相當(dāng)于40mg/kg劑量的雙苯氟嗪及共晶給予灌胃，于設(shè)定時(shí)間點(diǎn)眼眥取血，置于肝素化的離心塑料管中，血漿樣品甲醇處蛋白后，在堿性條件下采用液-液萃取，經(jīng)RP-HPLC測(cè)定，判斷房室模型，計(jì)算相對(duì)生物利用度;36只SD雄性大鼠隨機(jī)分為兩組，分別以40mg/kg及相當(dāng)于40mg/kg劑量的雙苯氟嗪及共晶給予灌胃，于給藥后1h、6h、24h處死迅速取出各組織，組織樣品經(jīng)勻漿后，在堿性條件下采用液-

6、液萃取，經(jīng)RP-HPLC測(cè)定各組織濃度。
　　 結(jié)果:
　　 (1)通過(guò)電位滴定法測(cè)得雙苯氟嗪的pKa=5.89;通過(guò)搖瓶法-紫外分光光度法測(cè)得油/水體積比例分別為1∶1、1∶3、1∶9時(shí)，雙苯氟嗪的logP分別為0.5900±0.0271、0.8540±0.0352、1.287±0.054。
　　 (2)PXRD、DSC-TG和THz譜的分析表明雙苯氟嗪和苯甲酸以摩爾比1∶2形成共晶。共晶的太赫茲譜中出現(xiàn)了明顯

7、不同于原料的新的吸收峰，表明太赫茲譜是探索新物相-共晶形成的有力手段。IR，Raman和NMR分析表明共晶中雙苯氟嗪和苯甲酸以O(shè)-H…O和O-H…F兩種氫鍵結(jié)合;25℃、31℃、37℃時(shí)共晶中API和CCF的表觀結(jié)合常數(shù)分別為4.611*109L2/mol2、3.488*109L2/mol2、1.806*109L2/mol2;25℃時(shí)共晶形成的熱力學(xué)參數(shù)△rGθ、△rHθ、△rSθ分別為-55.31kJ/mol、-59.87kJ/mol

8、、-15.27J/mol/K。共晶在水中的溶解度較原藥雙苯氟嗪有很大的提高，25℃、31℃和37℃時(shí)共晶的平衡溶解度分別為161.5、279.6、345.8μg/mL。在pH=4.5的NaAc-HAc緩沖溶液中，雙苯氟嗪、雙苯氟嗪-苯甲酸物理混合物以及共晶的t1/2分別為3.028h、1.405h、0.48h，共晶的釋放速率明顯快于原藥，釋放曲線擬合結(jié)果表明共晶的釋放符合Weibull模型。
　　 (3)雙苯氟嗪和共晶在大鼠體內(nèi)

9、的藥代動(dòng)力學(xué)均符合一室模型。雙苯氟嗪及其共晶的Cmax分別為1.054μg/mL和1.393μg/mL，Tmax分別為1.600h、1.119h，AUC分別為5.493μg/mL*h和14.28μg/mL*h，共晶相比原藥生物利用度為260％。血藥濃度數(shù)值經(jīng)配對(duì)t檢驗(yàn)，P=0.003，按0.05水準(zhǔn)，可以認(rèn)為共晶的藥代動(dòng)力學(xué)與原藥有顯著差異(P＜0.05)。經(jīng)組織分布研究，雙苯氟嗪在腎、小腸、肝、腦、肺中分布較多，藥物共晶在腦、腎、肝肺

10、中分布較多，相比于原藥，共晶在腦中含量增多，小腸中減小。
　　 結(jié)論:
　　 (1)雙苯氟嗪的pKa為5.89，與苯甲酸的△pKa≤3，具備形成共晶的條件;雙苯氟嗪的油水分配系數(shù)大于0，為低溶解度、親脂性的堿性藥物。
　　 (2)雙苯氟嗪與苯甲酸以摩爾比為1∶2的計(jì)量比形成共晶。共晶中API和CCF以氫鍵結(jié)合，結(jié)合常數(shù)高達(dá)109數(shù)量級(jí)，表明結(jié)合力很強(qiáng)。以上結(jié)果是在綜合各種固態(tài)表征手段和溶液熱力學(xué)公式的推導(dǎo)的基礎(chǔ)上