大鼠頜下腺腺病毒介導(dǎo)熒光素酶基因轉(zhuǎn)導(dǎo)后基因表達(dá)及組織結(jié)構(gòu)的研究.pdf

1、該研究目的是通過將腺病毒介導(dǎo)的熒光素酶基因轉(zhuǎn)導(dǎo)至Wistar大鼠頜下腺,建立涎腺基因轉(zhuǎn)導(dǎo)的方法并探討基因表達(dá)規(guī)律及轉(zhuǎn)導(dǎo)后腺體組織結(jié)構(gòu)的變化,從而為今后涎腺疾病的基因治療打基礎(chǔ).該研究主要分為兩大部分1.基因轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究 材料和方法：取正常健康純系、8～10周的Wistar大鼠40只.所有的動(dòng)物通過肌注3﹪戊巴比妥（1mg/kg）麻醉.在病毒感染前肌注阿托品（0.5mg/kg）目的是減少唾液的流率.病毒懸浮于稀釋的緩沖液,用塑料軟管插入頜下

2、腺導(dǎo)管約5mm深,按轉(zhuǎn)導(dǎo)熒光素酶基因后3天、1周、2周、1個(gè)月及2個(gè)月將40只動(dòng)物隨機(jī)分為5組,每組8只.每組中3只導(dǎo)入10<'8>pfu的AdCMVLuc/50ul/腺體,同時(shí)肌注地塞米松,按1mg/每只/天,連續(xù)注射3天;3只導(dǎo)入10<'8>pfu AdCMVLuc/50ul/腺體,不肌注地塞米松;2只導(dǎo)入病毒稀釋緩沖液50ul作為對(duì)照組.在不時(shí)點(diǎn)取大鼠頜下腺檢測(cè)熒光素酶活性.2.基因轉(zhuǎn)導(dǎo)后腺體組織結(jié)構(gòu)和超微結(jié)構(gòu)變化.材料和方法：同

3、前一部分大鼠,基因轉(zhuǎn)導(dǎo)后在取頜下腺檢測(cè)熒光素酶的同時(shí)取頜下腺進(jìn)行組織病理及超微病理觀察.結(jié)論：腺病毒介導(dǎo)的熒光素酶基因能成功轉(zhuǎn)導(dǎo)至Wistar大鼠頜下腺并表達(dá),其轉(zhuǎn)導(dǎo)表達(dá)隨時(shí)間而逐漸減弱,地塞米松能增加腺病毒介導(dǎo)涎腺短期基因表達(dá).腺病毒介導(dǎo)的熒光素酶基因轉(zhuǎn)導(dǎo)引起腺體明顯炎癥反應(yīng),基因轉(zhuǎn)導(dǎo)后腺體炎癥反應(yīng)在兩周內(nèi)最重,4周左右恢復(fù)正常.腺病毒介導(dǎo)的熒光素酶基因表達(dá)與腺體炎癥反應(yīng)密切相關(guān).該研究首次研究了大鼠頜下腺基因轉(zhuǎn)導(dǎo)后超微病理變化,發(fā)現(xiàn)