鼠皮層神經(jīng)元的NGF信號(hào)傳遞途徑及髓鞘膜蛋白、黃芪干預(yù)機(jī)制研究.pdf

1、中南大學(xué)博士學(xué)位論文鼠皮層神經(jīng)元的NGF信號(hào)傳遞途徑及髓鞘膜蛋白、黃芪干預(yù)機(jī)制研究姓名：張?jiān)婪迳暾?qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：楊期東20050501制、DNA修復(fù)障礙之間有何關(guān)系。因此，研究發(fā)育過(guò)程中成年皮層神經(jīng)元核苷酸的生理變化，有助于探討AD等變性神經(jīng)元出現(xiàn)DNA復(fù)制和DNA修復(fù)障礙的原因。另一方面，神經(jīng)變性疾病(如燦zheimer’sdiseases，AD)，腦血管病，脊髓外傷等神經(jīng)疾病，嚴(yán)重影響人們的健康。這些疾病的重

2、要治療措施就包括對(duì)神經(jīng)元的保護(hù)與促進(jìn)軸突的生長(zhǎng)。在促進(jìn)成年神經(jīng)元軸突生長(zhǎng)方面，不外乎兩方面的工作：一是去除軸突生長(zhǎng)的抑制性影響因素，第二就是使成年神經(jīng)元回到“年輕”的狀態(tài)。前者，如髓鞘成分抗體(Ⅱ‘l，Nogo阻斷劑；NEPl40，Nogo66的抑制物)的研究，可以有效的促進(jìn)軸突的生長(zhǎng)，但會(huì)冒脫髓鞘的風(fēng)險(xiǎn)：后者的研究則極少被人關(guān)注。而后者既能促進(jìn)軸突生長(zhǎng)又不會(huì)冒脫髓鞘的風(fēng)險(xiǎn)。因此，研究發(fā)育過(guò)程中軸突生長(zhǎng)的生長(zhǎng)機(jī)制交化，有助于找到能使成年

3、神經(jīng)元回到“年輕”的狀態(tài)并促進(jìn)軸突生長(zhǎng)的治療措施。對(duì)黃芪的藥理研究顯示，黃芪對(duì)免疫系統(tǒng)、血糖具有雙向的調(diào)節(jié)作用，以往的研究文獻(xiàn)也顯示出黃芪對(duì)新生的皮層神經(jīng)元具有保護(hù)作用。因此我們研究黃芪是否影響以及如何影響成年皮層神經(jīng)元的細(xì)胞活力、核苷酸吸收，并且研究黃芪是否具有去除軸突生長(zhǎng)的抑制性影響因素與促進(jìn)成年神經(jīng)元回到“年輕”的功能，探討黃芪是否具有促進(jìn)軸突生長(zhǎng)的作用。方法體外培養(yǎng)鼠皮層神經(jīng)元，加入NGF、黃芪、M^口作為細(xì)胞生長(zhǎng)干擾劑，再用信

4、號(hào)傳導(dǎo)途徑阻滯劑(尼莫地平阻斷L型鈣離子通道，新霉素鰲合PLC，xeStC阻斷Ⅱ3活化Ⅱ3受體)，阻斷各細(xì)胞生長(zhǎng)干擾劑誘導(dǎo)的信號(hào)事件。用Fura一2檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度，檢測(cè)H3Tdr(氚3胸腺嘧啶核苷酸)參與細(xì)胞代謝的量，用圖像分析儀統(tǒng)計(jì)萌芽(或軸突數(shù))。通過(guò)統(tǒng)計(jì)，探討神經(jīng)元發(fā)育過(guò)程中，MMP、黃芪影響核苷酸吸收的信號(hào)途徑，與黃芪對(duì)MMP的干擾作用。結(jié)果l、皮層神經(jīng)元吸收H3T“n=9)：①同空白組(43958士3312)相比，新生鼠