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文檔簡介
1、 本實驗采用RGA策略,根據(jù)已經(jīng)克隆的甜瓜抗枯萎病基因Fom-2和番茄抗枯萎病基因I2C以及黃瓜抗病基因同源序列設(shè)計了22條上游引物和17條下游引物,組成165對引物組合,用PCR方法對西瓜基因組DNA進行抗枯萎病基因相關(guān)同源序列的篩選。 研究結(jié)果:86對引物組合在抗枯萎病親本PI296341和感病親本97103之間擴增出多態(tài)性,多態(tài)性比例為52﹪。其中引物組合SF2/SR10擴增出的約700bp的多態(tài)性片段RGA210-70
2、0a和SF12/SR5擴增出的約500bp的多態(tài)性片段RGA125-500a與西瓜Fom-1基因連鎖,分別位于Fom-1基因的兩翼,遺傳距離分別為25cM和27cM。引物組合SF17/SR14、SF17/SR5、SF18/SR14和SF18/SR5在雙親間的擴增結(jié)果沒有多態(tài)性,但僅擴增出一條單一的條帶,大小與在甜瓜Fom-2基因上模擬PCR得到的片段完全一致。共20條目標片段被成功克隆測序,聚類分析將20條序列分為3組,除175S4n外
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