果樹單染色體及其R基因同源序列的分離與克隆.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、果樹是一類經濟價值很高的園藝作物,然而由于其自身的一些特點,使其遺傳研究難度很大,基因組研究更是處于落后狀態(tài).中國是多種重要果樹的起源中心,擁有十分豐富的果樹種質資源,而在果樹基因組研究方面卻剛剛起步.為此,該研究選擇一些具有中國特色的果樹種,擬將近年來發(fā)展起來的染色體微分離微克隆和同源序列擴增兩項新技術引入果樹基因組研究,探討它們在果樹的基因組研究中的可行性和應用價值.該研究選用典型小染色體的現代果樹種柚和相對大染色體的古老果樹種銀杏

2、為材料,從染色體標本的制備、微細玻璃針的制作、單染色體的顯微分離等方面進行了探索,建立了一套有效的木本果樹染色體顯微分離技術體系.在此基礎上,對分離的單染色體DNA進行了體外擴增,并對擴增產物進行克隆,構建了單染色體DNA的質粒文庫.根據已知植物抗病(R)基因的保守結構域設計特異簡并引物,從柚和銀杏的基因組DNA以及柚的花柱cDNA中對R基因同源序列(RGA)進行擴增和克隆,在此基礎上,結合染色體顯微分離技術,從單條染色體DNA及其擴增

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